Marcação de estruturas biológicas com tecnécio-99m

RESUMO

A marcação de hemácias com 99mTc é dependente de vários fatores. como a concentração de íon estanoso, o tempo e temperatura de incubação, 0 tipo de anticoagulante utilizado, a presença de proteínas plasmáticas entre outros. A concentração de íon estanoso parece ter grande relevância, por que, provavelmente, devido a hemácia não ter capacidade para incorporar indefinidamente este íon depois de determinada concentração limitada pela saturação do mecanismo responsável por esta captação. 0 excesso de agente redutor que permanece no meio extra-celular contribui para a marcação de proteínas plasmáticas com o radionucl ídeo em questão. Além de mecanismo ativo responsável pela captação do íon estanoso, um transporte passivo, não dependente de energia deve estar também associado devido a 500C ser observada alta incorporação de radioatividade nas hemácias. As ligações do 99mTc com a hemoglobina e as proteínas plasmáticas apesar de serem similares, estas devem ter características próprias como demonstrado pelas precipitações com álcool, acetona , TCA, HC1 e cloreto mercuroso. A heterogeneidade das proteínas plasmáticas poderia ser responsável por estes resultados. As modificações ocasionadas nas hemácias pelo aquecimento a 50°C e os resultados experimentais obtidos neste trabalho permitiram desenvolver um "kit" e técnica para realização de cintigrafia esplênica seletiva de maneira muito simples e com pouca manipulação. O 99mtc, em decorrência dos resultados obtidos com bactérias, pode ser um radionuclídeo alternativo para a marcação de culturas bacterianas. As preparações bacterianas. marcadas em concentração ótima de cloreto estanoso, apresentam uma grande estabilidade da marcação. não alteração da viabilidade assim como não modificação da mobilidade eletroforética. Hidrofobicidade, distribuição de ferritina catiônica e adesividade às celulas bucais . A fração protéica e, mais precisamente a lipoproteica parece ser a espécie molecular que fixa de maneira substancial 0 radionuclídeo utilizado no processo de marcação de bactérias com 99mtc como demonstrado pela grande sensibil idade a ação de enzima pronase e detergente Triton X-100

ABSTRACT

The labeling of red blood cells (RBC) with technetium-99m (99mTc) depends on several factors, as the stannous ion (Sn++) concentration, the time and temperature of incubation, the anticoagulant utilized, the presence of plasma proteins (PP) and others. However the Sn++ concentration seems to be the most important factor, probably, because the uptake of this reducing agent by RBC is limited. The excess of Sn++ in extra-cellular medium can determine the label ing of the PP. An active transport of Sn++ through the membrane, and also a passive mechanism, probably can be involved, because at 50°c the incorporat ion of 99mTc by RBC is still observed. Although the binding of 99mTc with hemoglobin and PP are similar, they appear to have specific characteristics as demonstrated by precipitat ion with alcohol, acetone, trichloroacetic acid, hydrochloric acid and mercury chloride. The heterogeneity of PP can be responsable for this fact. The modifications of RBC at 50° C described in the literature, the possibility of labeling the RBC with 99mTc at this temperature and the experimental results obtained made it possible to develop a kit and a procedure to perform spleen selective scint igraphy through a simple technique and with few manipulations. Due to the results obtained labeling bacteriae with 99mTc, this radionuclide can be an alternative to this purpose. The bacterial cultures labeled with Technitium-99m, at optimal Sn++ ion concentration, present a large stability and their viabil ity is not altered by this treatment. The electrophoretic mobility, the hydrophobicity, the cat ionized ferritin distribut ion and the adherence to human buccal epithelial cells are not modified too. The protein fraction and mainly the lipoproteins appear to be the molecule that fixed the radionucltide in this process. This is demonstrated by the sensibil ity of this fract ion to the enzyme pronase and the detergent Triton X-100. The possibility of labeling with 99mTc of planaria and cercariae of Schistossoma mansoni evolutive cycle increases the utilization of this radionuclide to an experimental level. The results described with the labeling of theses biological structures with 99mTc demonstrated that stable labeled and viable preparations are obtained