Validation of a liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for the detection of aflatoxin B1 residues in broiler liver / Validación de una técnica para detectar aflatoxina B1 en hígado de pollo por cromatografía líquida de alta performance acoplada a espectrómetro de masas en tándem

ABSTRACT

Aflatoxin B1 is a carcinogenic and mutagenic mycotoxin produced mainly by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus. It is the predominant mycotoxin found in raw materials used for the manufacture of broiler feeds. The aim of the present study was to develop a new and optimized method for the detection and quantification of aflatoxin B1 (AFB1) residues in broiler liver using solid phase extraction (SPE) clean-up and liquid chromatography-electrospray ionization/tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS) detection. The method was validated for linearity, accuracy, precision, limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ). The validation parameters indicated satisfactory linearity (r² >0.99), accuracy and precision (4.57% intra-day RSD; 14.65% inter-day RSD) a very high recovery (99 ±13%) and high sensitivity achieved for AFB1 in animal samples (LOD = 0.017 and LOQ= 0.050 ng/g). The method was effective for the detection and quantification of AFB1 residues in broiler liver and could also be potentially used for detecting AFB1 in other edible animal tissues after natural or experimental AFB1 exposure with high sensitivity and precision.

RESUMEN

La aflatoxina B1 (AFB1) es una micotoxina carcinogénica y mutagénica producida principalmente por Aspergillus flavus y Aspergillus parasiticus. Es la principal toxina que contamina las materias primas utilizadas para la elaboración de alimentos balanceados destinados a la alimentación de pollos parrilleros. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un método nuevo y optimizado para detectar y cuantificar bajos niveles de AFB1 en hígado de pollo, usando limpieza por extracción en fase sólida (SPE) y cromatografía líquida acoplada a detección por espectrometría de masa en tándem con ionización por electrospray (LC-ESI-MS/MS). Se validaron la linealidad, la exactitud, la precisión, el límite de detección (LOD) y el límite de cuantificación (LOQ). El método resultó tener linealidad (r²>0,99), exactitud y precisión muy satisfactorias (4,57% RSD intradía; 14,65% RSD interdía), un alto porcentaje de recupero (99 ± 13%) y la sensibilidad más alta lograda para la detección de AFB1 en muestras de origen animal (LOQ=0.050 ng/g y LOD = 0.017). El método fue muy efectivo para detectar y cuantificar bajos niveles de AFB1 en hígados de pollos parrilleros. Este método podría potencialmente utilizarse para la detección de esta toxina en otros tejidos y subproductos de origen animal luego de su exposición a AFB1 con una mayor sensibilidad y precisión.