Lactoferrina bovina disminuye la invasión de Salmonella enterica en células HEp-2 / Bovine lactoferrin decreases the invasion of Salmonella enterica to HEp-2 cells

RESUMEN

Objetivo: Evaluar el efecto de la lactoferrina bovina (Lfb) en el proceso de invasión de Salmonella enterica ser. Typhimurium en células HEp-2. Materiales y métodos: Se infectaron células HEp-2 con 10(6) unidades formadoras de colonia (UFC) de la bacteria en ausencia y presencia de 1 y 10 mg/mL de Lfb (saturada con hierro) durante 1,5 horas a 37°C. En este estudio evaluamos 2 tratamientos pre-infección (las células HEp-2 se incubaron con Lf 1 hora, previo a la infección con Salmonella) y post-infección (la Lfb se adicionó 15 minutos después de la infección). La capacidad de invasión de Salmonella se determinó mediante la cuantificación de las UFC recuperadas desde el interior de las células HEp-2 (después del tratamiento con 100 μg/mL y 10 μg/mL de gentamicina y Triton X-100). Resultados: En el tratamiento pre-infección se observó una disminución de 23% en la invasión de Salmonella cuando las células HEp-2 fueron pre-incubadas con 1 mg/mL de Lfb (2,8x10(5) vs 2,1x10(5), p=0,04) y una disminución de 50% cuando fueron pre-incubadas con 10 mg/mL de Lfb (2,8x10(5) vs 1,4x10(5), p=0,04). Con el tratamiento post-infección no se observaron cambios en la capacidad de invasión de Salmonella. Conclusiones: Los resultados indican que Lfb reduce la capacidad de invadir de Salmonella enterica ser. Typhimurium a células HEp-2 en el tratamiento pre-infección

ABSTRACT

Objective: To assess the effect of bovine lactoferrin (bLf) on the invasion of Salmonella enterica ser. Typhimurium to HEp-2 cells. Materials and methods: HEp-2 monolayers were infected with 10(6) colony forming unit (CFU) of bacteria in the absence and presence of 1 and 10 mg/mL of bLf (iron-saturated) and incubated 1.5 hours at 37°C. Two treatments were evaluated preinfection (HEp-2 cells were incubated with bLf one hour prior to infection with Salmonella) and post-infection (bLf was added 15 minutes after the infection). Invasiveness of Salmonella was determined throgh quantification of CFU recovered from inside the HEp-2 cells (after treatment with 100 μg/mL and 10 μg/mL of gentamicin and Triton X -100). Results: In the pre-infection treatment, we observed a decrease of 23% of Salmonella invasion when HEp-2 cells were pre incubated with 1 mg/mL of bLf (2.8x105 vs 2.1x105, p=0.04) and 50% when them were pre-incubated with 10 mg/mL of bLf (2.8x10(5) vs 1.4x10(5), p=0.04). In post-infection treatment, no changes were observed in the invasiveness of Salmonella. Conclusion: The results indicated that bLf reduces the invasiveness of Salmonella enterica ser. Typhimurium to HEp-2 cells in the pre-infection treatment