Detección de células madre mesenquimales de origen urinario mediante espectroscopia de impedancia / Detection of mesenchymal stem cells of urinary origin using impedance spectroscopy

RESUMEN

Resumen Introducción La medicina regenerativa es una rama de la medicina relacionada con el empleo de células madre (CM) para aprovechar su capacidad para reemplazar o regenerar células, tejidos u órganos, para restaurar una función dañada por alguna causa, incluyendo defectos congénitos, trauma y envejecimiento. Las técnicas de obtención, aislamiento e inmunotipificación (como son la citometría de flujo, pruebas de inmunofluorescencia y microscopia de fluorescencia, así como técnicas de biología molecular) actualmente requieren infraestructura y personal especializado, además de ser costosas y de difícil acceso. Objetivo Proponer y evaluar una técnica para la detección y aislamiento de células madre en muestras de orina mediante el empleo de un biosensor, con el uso de espectroscopia de impedancia asistida con nanosondas. Material y métodos Las células obtenidas fueron cultivadas y luego marcadas con nanosondas específicas para marcadores de células madre indiferenciadas de origen mesenquimal. Resultados Los resultados iniciales de la espectroscopia de impedancia eléctrica, donde se compararon células sin marcaje con nanosondas y células marcadas con nanosondas, no son concluyentes; sin embargo, tienen una tendencia a mostrar algunas diferencias entre ambas condiciones. Además, se realizaron análisis de microscopia de fluorescencia y multifotónica para corroborar la presencia de células madre mesenquimales.

ABSTRACT

Abstract Introduction: Regenerative medicine is a branch of medicine related to the use of stem cells (SC) to take advantage of their capacity to replace or regenerate cells, tissues or organs to restore a function damaged by some cause, including congenital defects, trauma and aging. The techniques for obtaining, isolating and immunotyping (such as fl ow cytometry, immunofl uorescence and fl uorescence microscopy tests, as well as molecular biology techniques) currently require specialized infrastructure and personnel, and they are expensive and diffi cult to access. Objective: To propose and evaluate a technique for the detection and isolation of stem cells in urine samples by using a biosensor with impedance spectroscopy assisted by nanoprobes. Material and methods: The cells obtained were cultured and then labeled with specifi c nanoprobes for markers of undifferentiated stem cells of mesenchymal origin. Results: The initial results of electrical impedance spectroscopy, where cells without labeling were compared with cells labeled with nanoprobes, are inconclusive; however, they tend to show some differences between both conditions. Additionally, fl uorescence and multiphoton microscopy analysis were carried out, as well as fl ow cytometry, to corroborate the presence of mesenchymal stem cells.