Isolation and characterization of mutants affected in the expression of the nar operon Escherichia coli

RESUMEN

En el sistema nitrato reductasa de E. Coli, la máxima expresión del operon nar se obtiene bajo condiciones de anaerobiosis y en presencia de nitrato. Las mutaciones en las cepas obtenidas con el fago Mudl (Ap,lac), las cuales crecían anaeróbicamente sobre lactosa únicamente si se añadían nitrato am medio, mapearon en el locus (chlC), en el minuto 27 del mapa de E. Coli. En tales cepas que carecían de actividad nitrato reductasa medidas con benzilviologeno o con formiato, la síntesis de ß-galactosidasa refleja la regulación a nivel transcripcional del operon nar intacto. A partir de esas cepas se aislaron expontáneamente dos clases de mutantes regulatorias. Aquellas pertenecientes a la clase I sintetizaban ß-galactosidasa anaeróbicamente en ausencia de nitrato, mientras que en las cepas de la clase II tal síntesis era parcialmente independiente del nitrato pero no era reprimida por el oxígenio. Resultados obtenidos por transducción con el fago Pa, revelaron que la mutación presente en las cepas de la clase I estaba muy cercana al opron nar. La mutación probablemente afectó un elemento que actúa en cis o, alternativamente, un gen que codifica para una proteína que afecta negativamente la expresión del operon nar GHJI