Método de aglutinación de látex para la detección de antígeno de superficie de hepatitis B* / Metodo of latex agglutination for the detection of hepatitis B surface antigen

RESUMEN

Se desarrolló una prueba de aglutinación de látex para la detección de antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAG). Se sensibilizaron partículas de látex de 0,739u con anticuerpo monoclonal (MAB) específico contra una determinante inmunodominante del HB-sAG o bien con anticuerpo anti-HBs de cabra o conejo purificado por afinidad. Se mezclaron 25ul de partículas sensibilizadas con 50ul de muestra y 25ul de buffer glicina salino (GBS) que contiene 2%de polietilenglicol (PEG) 6.000 urea 0,4M, 0,25%de albúmina sérica bovina (BSA) y 10%de sacarosa, sobre una placa negra, agitándose durante 10 min. Aspecto lechoso indica muestra no reactiva, mientras que la presencia de grumos indica muestra reactiva. Las partículas cubiertas con Mab mostraron una sensibilidad de 100 ng/ml mientras que las cubiertas con anti-HBs de conejo mostraron una sensibilidad de 20ng/ml. Empleando sueros ensayados por radioinmunoensayo (RIA), pudo comprobarse que la prueba de látex posee sensibilidad y especificidad similares a la hemaglutinación reversa pasiva (rPHA). El ensayo debe realizarse con suero fresco libre de factor reumatoide que produce falsos positivos