Determinación colorimétrica de proteínas glicadas en sangre entera. Recolección de muestras en papel de filtro. Valores de referencia en niños / Colorimetric determination of glycated whole blood protein collection of samples on filter paper. Reference values on children

RESUMEN

Las proteínas glicadas en sangre entera (PGSE) constituyen un parámetro que permite el seguimiento del control glucémico en pacientes con Diabetes mellitus, ofreciendo información de la glucemia promedio en los dos a tres meses previos. En el presente trabajo se llevó a cabo la puesta a punto del método colorimétrico del ácido 2-tiobarbitúrico (ATB) para medir PGSE, recolectada en papel de filtro. El fundamento del método consiste en la conversión del glúcido unido a la proteína a 5-hidroximetilfurfural (5-HMF) por calentamiento a 100 C en presencia de ácido oxálico. Por reacción entre 5-HMF y ATB se forma un compuesto coloreado que puede cuantificarse a 443 nm. Se estableció una comparación de los resultados de PGSE con HbA, medida por cromatografía de intercambio iónico (r=0,505) y por método colorimétrico del ATB (r=o,948). Este último estudio comparativo permite demostrar que las PGSE están constituidas en un 70-90% por HbA1, correspondiendo el porcentaje restante a proteínas séricas glicadas. También se estudió una población infantil normal obteniéndose un intervalo de referencia para PGSE de 41-87 nmol fructuosa/10mg proteínas; y una población infantil diabética, tipo I, observándose que el método en estudio permite diferenciar claramente los pacientes diabéticos compensados de aquellos no compensados. Los C.V.% intra e interensayo para estándares fueron inferiores a 4,3 y 5,3% respectivamente, en tanto para muestras fueron de 4,5 y 6,5% respectivamente. Además se observó que el método es sensible, barato y presenta ventajas respecto de otros métodos, ya que elimina la interferencia de hemoglobinopatías, aductos de Hb no glicadas y forma aldimina inestable; y no es influido por el pH y la temperatura