Otimizaçäo do processo de purificaçäo industrial de toxóide tetânico por gel filtraçäo / Improvement in the industrial purification of tetanus toxoid by gel filtration

RESUMO

A metodologia industrial para obtençäo de Toxóide Tetânico(T.T.) atual, consiste na pré-precipitaçäo pelo (NH4)2SO4 seguida de gel filtraçäo em Sephadex G-50, com o qual obtém-se grau médio de pureza de 2.300 Lf/mgNP, sendo que o mínimo exigido pela O.M.S. é 1.000Lf/mgNP. Visando basicamente a diminuiçäo do tempo empregado no processo de purificaçäo do T.T., utilizamos resinas cromatográficas de 2§ e 3§ geraçäo, o Sephacryl S-100HR e o Superdex 75 prepgrade, respectivamente, que possibilitaram a eliminaçäo da etapa de pré-precipitaçäo pelo (NH4)2SO4 obtendo-se resultados com grau de pureza ao redor de 3.000Lf/mgNP. A atividade imunogênica destes produtos quando absorvidos pelo Al (OH)3 em concentraçäo de 15Lf/ml foi de 4,5UI/ml em cobaios. A O.M.S. recomenda que o T.T. induza a formaçäo de no mínimo 2UI/ml nestes animais. O rendimento do processo de purificaçäo foi de 88,46//, que é similar ao obtido no processo atual. A metodologia introduzida permitiu a diminuiçäo do tempo empregado neste processamento assim como a possibilidade de trabalhar-se com purificaçäo em sistema fechado (coluna cromatográfica)