Producao e propriedades de beta-galactosidade de Kluyveromyces fragilis NRRL Y-2415 / Production and properties of the Kluyveromyces fragilis NRRL Y-2415 beta-galactosidase

RESUMO

Permeado de soro de queijo e soro de proteinado por acidificacao podem ser utilizados como meio de crescimento de Kluyveromyces fragilis NRRL Y-2415 para obtencao de beta-galactosidase. A suplementacao destes meios com 0,1//de (NH4)2SO4 e 0,05//de KH2PO4 aumenta as producoes de massa celular seca e beta-galactosidase. A extracao da enzima das celulas de levedura feita por autolise em tampao fosfato e 2//de cloroformio foi mais rapida do que quando se substituiu o cloroformio por 2//de tolueno, sendo a atividade obtida funcao da concentracao celular na suspensao. Esta enzima tem pH otimo entre 6,6 e 6,8; a sua estabilidade com respeito a pH de pre-incubacao por uma hora e baixa, o que indica que durante o processo de sua obtencao deve-se trabalhar na faixa otima de pH e temperaturas baixas. Quanto a temperatura de atividade maxima, nao ha diferenca em trabalhar a 30 graus centigrados e a 37 graus centigrados; a 50 graus centigrados a enzima e totalmente inativada. Uma alternativa para pre-purificar esta enzima e utilizar membranas. Usando membrana de 0,08 micro, foi possivel obter o extrato enzimatico livre de fragmentos celulares; com outra de 15.000 Daltons, foi possivel aumentar sua concentracao, obtendo-se no final extrato com 2.500 unidade internacionais de ortonitrofenil beta-D-galactopiranosideo por mL