Effect of pH and temperature on Bacillus subtilis ATCC 601 alfa-amylase production. Some properties of the crude enzyme

RESUMO

Neste trabalho foram estudadas a influência do pH inicial do meio de cultura e da temperatura de crescimento sobre a produçäo de alfa-amilase por Bacillus subtilis ATCC 601, bem como algumas propriedades da enzima bruta. Houve maior produçäo de enzima quando a fermentaçäo foi realizada a 37oC. A atividade enzimática específica global, Emax/Xmax' mostrou que a maior concentraçäo enzimática no caldo de cultura fermentado a 37oC näo foi devida a um maior crescimento celular e sim a uma maior síntese de enzima por unidade de massa celular. O estudo do efeito do pH inicial do meio de cultura sobre a produçäo da enzima mostrou que ela ocorreu preferencialmente a pH 7,0, também devido a um estímulo da sítese por unidade de massa celular. A temperatura ótima da enzima está ao redor de 50oC e o seu pH ótimo está entre 5,4 e 6,4. A alfa-amilase de Bacillus subtilis ATCC 601 mostrou-se pouco estável a 60oC foi completamente inativada quando mantida durante 10 minutos a 80oC. Ions Ca +2, nas concentraçöes de 10mM e 20mM, estabilizaram sensivelmente a enzima, enquanto que a adiçäo de EDTA 10mM a desestabilizou de tal modo que a enzima apresentou a 50oC um comportamento semelhante ao observado a 80oC. Näo houve formaçäo de glicose quando o amido foi hidrolisado por esta alfa-amilase. Os açúcares formados variaram de maltose à maltoheptaose