Entamoeba histolytica: detection of coproantigens by purified antibody in the capture sandwich ELISA

RESUMO

Foi desenvolvido um teste de ELISA de Captura usando anticorpos policlonais purificados obtidos em coelhos contra tres diferentes cepas axenicas de Entamoeba Histolystica(ICB-CSP and ICB-462 do Brasil e HM1 do Mexico)para deteccao de coproantigenos em amostras de fezes de individuos: a) sintomaticos, b)assintomaticos, c)com outros parasitos intestinais, e d)sadios. Imunoglobina G (IgG) contra E. histolystica foi isolada de imune soro de coelho, em duas etapas: cromatografia de afinidade em uma coluna contendo antigenos de E. histolystica unidos a Sepharose 4B, seguido por outra cromatogradia em Sepharose 4B Proteina A. O teste de ELISA usando anticorpos purificados, foi capaz de detectar ate um so trofozoito por lamina ou 70 ng de proteina de ameba por orificio, apresentando uma sensibilidade de 93 por cento e uma especificidade de 94 por cento. A combinacao do exame microscopico com o metodo ELISA de Captura teve uma concordancia e discordancia de 93,25 por cento e 6,75 por cento, respectivamente. Pode-se concluir que o teste de ELISA de Captura utilizando anticorpo purificado e altamente especifico para a deteccao de coproantigenos de E. histolystica em fezes de pacientes infectados, rapido, facil e mais sensivel que o exame microscopico.