Detection of human papillomavirus in juvenile laryngeal papillomatosis using polymerase chain reaction

RESUMEN

Con el objeto de identificar la presencia del virus del papiloma humano (VPH) y sus tipos en casos de papilomatosis laríngea juvenil (PLJ) se procedió a analizar mediante reacción en cadena de polimerasa (RCP) a 20 ejemplos de esta lesión en 12 pacientes, algunos con más de 10 años de antigüedad; las muestras fueron procesadas e incluidas en parafina. Conociendo la gran variabilidad genética del VPH se eligió una secuencia correspondiente a la región L1 del genoma, zona muy conservada para la especie y que permite identificar la mayoría de los subtipos conocidos de este virus. En la primera ronda de amplificación se obtuvieron resultados positivos con los cebadores MY09-11 (región L1) en 10 muestras. En una segunda ronda de amplificación (nested-PCR) con los cebadores GP5-6 se positivaron un total de 20 muestras, demostrando la mayor sensibilidad de esta segunda técnica. Para amplificar una región altamente variable del genoma (E6) se utilizaron cebadores específicos para subtipos 6-11 (H6/11L1-R2), lo que permitió identificar la presencia de estas variantes en 7/12 muestras. No siendo infrecuente la detección de más de un subtipo, la presencia de las variedades mencionadas no excluye la presencia de otros subtipos. Los resultados demuestran que 1) el VPH está presente en casos de PLJ, 2) los subtipos más frecuentes parecen incluir el grupo 6-11, 3) el uso del método de RCP es aplicable a material de archivo procesado en forma de rutina en un laboratorio de patologia