Compartimiento nucleolar de la DNA-Topoisomerasa I en células HEp-2.Estudio con los sueros de pacientes con esclerodermia difusa / Nucleolar DNA Topoisomerase I: Compartiment with HEp-2 Serum study in patients with Diffuse Scleroderma

RESUMEN

Estudiamos la prevalencia de anticuerpos contra la DNA-topoisomerasa y su restricción a isotipos, en 20 anticuerpos anti-nucleolares positivos.Los isotipos fueron determinados en pruebas de inmunofluorescencia indirecta con células HEp-2 y anticuerpos monoclonales anti-IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4La especialidad anti-DNA-topoisomerasa I se determinó por pruebas de doble difusión en agar y por Western blot,utilizando como antígeno, extracto de timo de ternera y un suero prototipo anti-Scl-70. Resultados: Los patrones de fluorescencia tuvieron una localización nucleolar en todos los casos y el 75 por ciento presentó conjuntamente patrón nucleosomal. En pruebas de doble difusión, de los 20 sueros, siete (35 por ciento)reconocieron los extractos de timo de ternera y de ellos, 4(20 por ciento) presentaron especificidad anti-DNA-Topoisomerasa I. Por Western blot, 15 sueros (75 por ciento) mostraton bandas reactivas a un antígeno de 70 kD (DNA-Topo I) y fueron de subclase IgG1.Estos resultados nos permiten concluir que los sueros de Esclerodermia con anticuerpos anti-nucleolares presentan , en gran proporción , especificidad anti- DNA- topoisomerasa I; no obstante, las pruebas de precipitación en agar, no son lo suficientemente sensibles para detectar su prevalencia real; para este propósito, se requiere de pruebas sensitivas como el Western blot