Desenvolvimento e aplicaçäo de um método imunofluorométrico para a dosagem de tirotrofina humana (TSH) no soro e em sangue total colhido em papel de filtro / Development and aplication of the immunofluorometric method for the measurement of thirotopin (TSH) in serum and in total blood collected in filter paper

RESUMO

Visando o desenvolvimento de um ensaio específico, rápido e sensível para a dosagem de tirotrofina (TSH) tanto no soro como em amostras de sangue total colhidas de recém-nascidos, em papel de filtro, primeiramente produzimos anticorpos monoclonais contra TSH. Empregando um dos anticorpos produzidos (B6P4), altamente específico contra TSH humano, como anticorpo de captura em fase sólida (placas de microtitulaçao), e um anticorpo monoclonal contra subunidade alfa de TSH marcado com Európio, de origem comercial, desenvolvemos um ensaio imunofluorométrico. Tal ensaio, quando aplicado a amostras de soro lOOmuL), apresenta uma sensibilidade de O,05 mUI/L, com coeficiente de variaçäo (CV) intraensaio inferior a 10 por cento entre os valores de 0,1 a 400 mUI/L e interensaio de 17,3 por cento, 10,1 por cento e 11,4 por cento para soros de valores médios de O,82, 13,7 e 36,2 mUI/L, respectivamente. Quando aplicado a amostras de sangue total colhido em papel de filtro, a sensibilidade é de 2 mUI/L com o emprego de discos de 3mm de diâmetro, o CV intraensaio inferior a 10 por cento entre os valores 10 e 100 mUI/L e o interensaio de 1O,8 por cento para um sangue de valor de 80 mUI/L; em ambos os casos o tempo total de execuçäo é de menos de 24 horas. A aplicaçäo da metodologia a mais de 13.000 amostras colhidas em papel de filtro, e a soros de diferentes tipos de patologias tiroideanas, mostrou que a mesma é superior todos os aspectos ao radioimunoensaio até entäo empregado.