Obtençäo e caracterizaçäo de linhagem de células osteoblásticas / Development and characterization of osteoblast-like cell line

RESUMO

Apresentamos metodologia para obtençäo de linhagem de células osteoblástica propagada a partir de tecido ósseo normal. Por meio de técnica de dispersäo enzimática células isoladas do osso parietal de ratos recém-nascidos foram cultivadas em meio de Eagle modificado por Dullbecco supplementado com soro fetal bovino (10 por cento). Após a primeira passagem as culturas foram induzidas pela suplementaçäo do meio com ß-glicerofosfato de sódio (10mM), ácido ascórbico (50ug/ml) e dexametasona (10 elevado a -8 M) para obtençäo de diferenciçäo fenotípica e funcional. A morfologia, presença de atividade de fosfatase alcalina, produçäo de nódulos calcificados, expressäo imunocitoquímica de proteínas do tecido ósseo colagênicas (colágeno tipo I) e näo colagênicas (osteonectina e sialoproteína óssea-II) comprovaram a natureza osteoblástica da linhagem obtida. O sistema desenvolvido confirmou que a técnica de cultivo celular primário a partir de tecido ósseo normal é viável e origina células com as características básicas dos osteoblastos. Essa metodologia de obtençäo de células osteoblásticas pode ser utilizada amplamente em Odontologia, em especial, nos estudos da fisio-patologia óssea e em testes de compatibilidade de biomateriais que estaräo em contato constante com o tecido ósseo