Fragmentación en geles de sds-poliacrilamida e inmunotransferencia para la detección de antigenos de una cepa de trypanosoma cruzi aislada en el país y su evaluación con el método de microelisa

RESUMEN

Por ser el Trypanosoma cruzi un protozoario de estructura bioquímica compleja presenta en su cubierta celular externa antígenos específicos de su especie y antígenos de reacción cruzada con otros microorganismos. El trypanosoama cruzi comparte el 60 por ciento de sus antígenos solubles con el trypanosoma rangeli,el 30 por ciento con lesihmania donovani y leishmania mexicana y algunos determinantes antigénos con micobacterium tuberculoso. En forma adicional evidencias ecperimentales indican que las cepas de trypanosoma cruzi aisladas a partir de diferentes áreas geográficas de Latinoamérica, se comportan de manera distinta una de otra en el campo inmunológico, clínico y farmacológico. En este estudio demostramos que en el trypanosoma cruzi existen moléculas antigénicamente específicas del parásito, las mismas que al ser utilizadas en el inmunodiagnóstico incrementa la especificiadad de la prueba. En tanro que la sensibilidad mejora al utilizar este antígeno con la técnica de microELISA, la misma que detecta cantidades de anticuerpos en el rango de manogram,os-picogramos. Al realizar el fraccionamiento de las diferentes proteínas estructurales en geles SDS-poliacrilamida de una cepa de trypanosoma cruzi aislada en el país, luego de la subsiguiente inmunotransferencia de esta electroforesis a papel de nitrocelulosa, se logró seleccionar las fracciones antigénicas de 63, 76, 80 y 91 Kd que son reconocidas específicamente por sueros de pacientes con enfermedad de chagas en su fase crónica.Con estos antígenos se estandarizó el inmunodiagnóstico con la prueba de micro elisa. En este inmunoensayo se puede diferenciar con un amplio rango de diferencia las densidades ópticas (DO) de los sueros provenientes de pacientes chagásicos (D.O 1,797), en relación a los sueros provenientes de pacientes chagásicos (D.O. 1797), en relación a los sueros provenientes de pacientes con leishmaniasis D.O 0.0099),lepra (D.O 0.012), tuberculosis (D.O 0.092), sífilis (D.O 0.067), toxoplasmosis (D.O 0.024). Quedando demostrado la especificidad de las bandas seleccionadas para reconocer sueros de pacientes chagásicos. En forma adicional, en relación a estas moléculas, es importante determinar su naturaleza bioquímica y su papel biológico en la fisiología de trypanonoma cruzi y en la relación huésped-parásito con miras de buscar nuevas estrategias de lucha frente a la enfermedad de chagas.