Leishmanioses: reaçäo de imunofluorescência indireta para pesquisa de anticorpos IgM em fraçöes de soros separados por cromatografia de gel filtraçäo / Leishmaniasis: indirect immunofluorescent test to detect IgM antibodies in serum fractions separated by gel filtraction cromatography

RESUMO

Um total de 143 soros de pacientes (120 da forma cutânea localizada, seis da mucocutânea e 17 com leishmaniose visceral), provenientes de ambulatórios ou de hospitais do Grande Rio de Janeiro, suspeitos de leishmaniose tegumentar ou visceral americanas, foi submetido às reaçöes de imunofluorescência indireta (RIFI-IgM e IgG). Estes soros foram selecionados porque se apresentavam com RIFI-IgG de títulos elevados ou eram RIFI-IgM reagentes no soro. Como existe a possibilidade de falsos resultados de IgM näo reagentes na presença de títulos elevados de IgG e falsos IgM reagentes, devido à presença de fator reumatóide (autoanticorpos IgM anti-IgG), utilizou-se a separaçäo das fraçöes IgM e IgG do soro destes pacientes. Para isro, procedeu-se a separaçäo destas imunoglobulinas em coluna de Sephacryl S-300, nos casos em que os soros eram IgM negativo e IgG maior ou igual a 360, com a finalidade de se detectar falsos negativos e, em soros IgM reagentes, falsos positivos. Nestes últimos, também realizou-se a prova do látex para fator reumatóide. Deste modo a RIFI-IgM da fraçäo IgM separada no Sephacryl permitiu evidenciar apenas um soro - de paciente da forma cutânea localizada (0,7 por cento) - falso negativo por provável competiçäo com títulos de anticorpos IgG elevados. Por outro lado, permitiu o encontro de 23 (16,1 por cento) soros RIFI-IgM falso-reagentes para leishmanioses, devido à presença de fator reumatóide (seis soros eram de leishmaniose mucocutânea e os 17 restantes de leishmaniose visceral). Em outros indivíduos da forma cutânea localizada (8,4 por cento) a RIFI-IgM do soro e a RIFI da fraçäo IgM eram reagentes, embora também tivessem positivos (maior ou igual a 20 U/ml) à prova do látex, como os outros 23 indivíduos anteriores. Os 107 indivíduos restantes (74,8 por cento) foram RIFI-IgM reagentes no soro e na fraçäo IgM, mas, entretanto, todos eram negativos para fator reumatóide. Todas as RIFI-IgM das fraçöes IgM eram näo-reagentes. Os resultados demonstram a utilidade da presente metodologia na obtençäo de maior confiabilidade nos testes de RIFI-IgM para leishmanioses