Generación de clonos de linfocito T antipéptido derivado de las proteínas del Mycobacterium tuberculosis

RESUMEN

Se busca reconocimiento de diferentes proteínas del Mycobacterium tuberculosis que poseen actividad antigénica y confieren protección a pacientes con TBC. Se analizan sonicados de la cepa virulenta y rugosa H37Rv, se separan proteínas por peso molecular y se purifican; se reconocen por medio de sueros de pacientes o con antísueros de conejos. Se escogieron antígenos para ser producidos en el Instituo de Inmunología y se toma un antígeno que en ensayos anteriores mostró generación de respuesta de hipersensibilidad retardada; éste fuéel Ag MPT 59 y surgió el péptido S15. Con este péptido se inmunizaron ratones y se le extrajo el bazo. Se separaron células T y fueron cultivadas en presencia de células presentadoras del Ag de ratones singenéicos tratados previamente con Mitomicina C. Estas células fueron estimuladas con el péptido S15 y cultivadas, siendo estimuladas con células presentadoras, antígeno e interlukeina 2 (IL-2) cada 8 días. Con estas células se realizaron ensayos de proliferación midiendo la incorporación de timidina tritiada, y ensayos in vivo con transperitonealmente y se retaron con el Ag. Los péptidos S8 y S15 inducen un relativo alto grado de proliferación, lo que lleva a pensar que expresan determinantes antigénicos que son reconocidos por células inmunes al Mycobacterium tuberculosis