Estudo do promotor do gene COL1A2 em portadores de fibromatose gengival hereditária / Study of the COL1A2 promoter from patients with hereditary gengival fibromatosis

RESUMO

A Fibromatose Gengival Hereditária (FGH) é uma condiçäo em que há aumento da secreçäo de proteínas da matriz extracelular, especialmente de colágeno tipo I. Condiçöes particulares individuais como polomorfismos genéticos ou mutaçöes poderiam influir na resposta de fibroblasto a estímulos do ambiente, provocando essa doença de causa ainda desconhecida. Assim, procuramos identificar polimorfismos ou mutaçöes na regiäo do promotor da cadeia alfa 2 do colágeno do tipo I (COL1A2) em um grupo de pacientes normais (n = 13). Além disso, testamos a hipótese de alteraçäo no padräo de metilaçäo dessa seqüência através da análise de metilaçäo. Foi feita a amplificaçäo por PCR da regiäo do promotor da cadeia alfa 2 do colágeno entre -340 e +2 pares de base (pb). Seguiu-se a análise de heteroduplex aquecimento das amostras a 98§C por 5 minutos, resfriamento a 0§C, manutençäo a 20§C por uma hora e eletroforese em gel de poliacrilamida a 6 por cento. A análise de metilaçäo foi feita através do uso de enzimas de restriçäo (HAL III e HPA II, que näo clivam as suas seqüências da reconhecimento de Dna quando estas estiverem metiladas) previamente à reaçäo de PCR. Näo houve diferença na migraçäo dos fragmentos de DNA após a reaçäo de heteroduplex, nem foi determinada alteraçäo no padräo de metilaçäo entre os dois grupos de indivíduos. Esses achados indicam que mutaçöes ou alteraçöes no padräo de metilaçäo da regiäo do promotor do COL1A2, compreendida entre -340 e +2 pb, provavelmente näo estäo relacionadas ao crescimento gengival de portadores de FGH