Produçäo induzida de anticorpos in vitro: novo método para o diagnóstico de infecçäo perinatal pelo vírus da imunodeficiência humana / Induced production of in vitro antibodies: new method for diagnosis of perinatal infection by human immunodeficiency virus

RESUMO

Tendo em vista a capacidade de células mononucleares (CM) de sangue periférico de indivíduos infectados pelo HIV secretarem anticorpos espontaneamente in vitro, foi desenvolvido um novo método laboratorial de produçäo induzida de anticorpos anti-HIV 1 in vitro (IVIAP) a ser utilizado no diagnóstico de infecçäo perinatal. Empregaram-se, na padronizaçäo da IVIAP, CM de dois grupos 33 adultos e 30 crianças infectados pelo HIV-1 e 16 adultos e 21 crianças sem dados epidemiológicos, hiv-1-soronegativos. Para estimular a secreçäo de anticorpos in vitro foi usado antígeno bruto do HIV-1 adsorvido a placas de um kit comercial de ELISA e testadas várias concentraçöes de CM e diferentes tempos de cultura. Os anticorpos produzidos pela CM foram detectados na placa, por reaçäo imunoenzimática, com os reagentes do próprio kit e as instruçöes do fabricante. Os resultados obtidos mostraram que näo houve reaçäo cruzada ou falso-positiva quando foram avaliadas CM do grupo controle HIV-1 soronegativo. No grupo de indivíduos infectados foi possível determinar como sendo 10 elavado a quinta CM por orifício da placa e 24h de cultura a condiçäo ideal para resultar uma IVIAP positiva. Para comparar a eficiência da IVIAP em relaçäo a outras técnicas de secreçäo de anticorpos in vitro, foram utilizadas CM de 19 adultos e 13 crianças infectados pelo HIV-1 na IVIAP, IVAP e ELISPOT, demonstrando que a IVIAP foi mais sensível para detectar infecçäo pelo HIV, nos casos pediátricos. De um grupo de 57 crianças, acompanhado clínica e laboratorialmente por um período médio de 18 meses, foi possível comparar os resultados obtidos na IVIAP com os da sorologia para o HIV, antigenemia p24 e reaçäo em cadeia de polimerase (PCR). Observaram-se resultados falso-negativos nos casos de hipogamaglobulinemia. A IVIAP se mostrou mais sensível para detectar infecçäo pelo HIV que a sorologia e a antigenemia p24. Houve concordância entre os resultados obtidos na IVIAP e na PCR. Neste estudo a IVIAP apresentou 91 porcento de sensibilidade e 96 porcento de especificidade. Concluindo foi possível desenvolver um novo método laboratorial para o diagnóstico de infecçäo perinatal pelo HIV-IVIAP - sendo sensível, específico, rápido, prático e de baixo custo, podendo ser usado com crianças de mais de dois meses de idade.