Cultivo in vitro de ovócitos bovinos em diferentes sistemas: II - aspectos ultra-estruturais / In vitro cultivation of bovine oocytes, under different conditions: II - ultrastructural aspects

RESUMO

Para avaliar o efeito de sistemas de cultivo in vitro na ultra-estrutura celular, foram cultivados ovócitos com o cumulus compacto distribuídos em três tratamentos I - meio de cultivo constituído de meio de cultura de tecido (TCM) acrescido de FSH (20µg/ml) e soro inativado de vaca em estro (10 por cento); II - meio de cultivo acrescido de células da granulosa em suspensäo (2 x 10 elevado a sexta potência/ml); III - monocamada de células da granulosa em meio de cultivo. As amostras foram obtidas em zero, 12, 18, 24 e 30 horas de cultivo e submetidas aos procedimentos para a análise ultra-estrutural. As características verificadas nos ovócitos foram caracterizadas em cinco configuraçöes (C1 a C5), levando em consideraçäo vários estádios de maturaçäo. Para esta classificaçäo foram consideradas as modificaçöes ultra-estruturais no interior do ovócito, sendo C1 um ovócito sem alteraçäo indicativa de reativaçäo da meiose, C2, C3 e C4 estádios intermediários e C5 um ovócito maduro caracterizado principalmente pela configuraçäo cromossômica em metáfase II e pela distribuiçäo dos grânulos corticais em posiçöes solitárias nas proximidades da membrana citoplasmática. Foram verificados os seguintes resultados, para os tratamentos I, II e III, respectivamente zero hora (C1 e C2, C1 e C2, C1 e C2), 12 horas (C4, C3 e C3), 18 horas (C5, C4 e C4), 24 horas (C5, C5 e C5) e 30 horas (C5, C5 e C5). No cultivo sem células da granulosa, as características que configuram um ovócito maduro sob aspecto ultra-estrutural já ocorrem com 18 horas de cultivo