Cuantificacion de amiodarona en suero mediante precipitacion de proteinas seguida de cromatografia liquida de alta resolucion con deteccion ultravioleta / Measurement of serum amiodarone by protein precipitation followed by high performance liquid chromatography with ultraviolet detection

RESUMEN

Nos propusimos desarrollar un método para la medición de amiodarona en suero mediante cromatografia líquida de alta resolución con detección ultravioleta, optimizando las condiciones analíticas descritas en la literatura y determinar las condiciones óptimas de almacenamiento de la muestra, para la instalación de un servicio nacional de referencia. la preparación de la muestra consistió en la adición de 2 partes de acetonitrilo a 1 parte de suero, agitación por 45s, incubación a 24§C por 5 min, centrifugación a 6000 x g durante 2 min e inyección de 20 mu L del sobrenadante al cromatógrafo. Utilizando una columna mu Bondapak CN RP (3.9 x 150 mm) a 45§C, con una fase móvil compuesta por KH2PO4 10 mM/metanol/acetonitrilo (40:37:223 v/v/v) a pH 3,5, bombeada a 0,6 mL/min, obtuvimos un tiempo de retención de 4,9 min. La detección se realizó a 242 nm, y la cuantificación mediante comparación con estándares externos; el límite de detección fue de 0,11 mu g/mL. La relación masa/respuesta fue lineal (r2 > 0,99) para inyecciones con masa nominal de 2,96 a 18930 ng, lo cual excede lo requerido para el monitoreo de amiodarona sérica (0,3 a 6,0 mu g/ml). La recuperación fue de 99,26 por ciento más o menos 2,84 por ciento. El almacenamiento a -16§C de muestras precipitadas evita la degradación de la droga. Este método resultó más eficiente, sencillo y económico que otros ya descritos, manteniendo la sensibilidad, especificidad y linealidad requeridas para ser considerado un método óptimo para la cuantificación de amiodarona en suero.