Embriogênese renal de ratos: participação das catepsinas S e H, correlação com fatores de crescimento / Embryonic kidneys of rats: participation of cathepsins S and H, correlation with growth factors

RESUMO

Durante o desenvolvimento renal muitas proteases são secretadas nos ambientes intra e extracelular para participarem da remodelação da matriz extracelular (MEC). A proteólise tem sido também relacionada a eventos estimulatórios e inibitórios determinados por fatores de crescimento durante a nefrogênese. Foram utilizados neste estudo técnicas de cultura de rim embrionário, identificação gênica atravésdo método de PCR pela reverse transcriptase (rtPCR) e a cultura tridimensional de células em gel de colágeno I. Observou-se que o desenvolvimento embrionário renal é fortemente afetado pelas catepsinas S e H que funcionam como mediadores da atividade de fatores de crescimento com o HGF, NGF e o TGF-b em mecanismo variável do ponto de vista de dose e local de ação, assegurando alta especificidade destes polipeptídeos durante os eventos de crescimento e diferenciação. A expressão das catepsinas S e H durante o crescimento do rim embrionário varia de acordo com a idade gestacional do órgão, de tal forma que se observa expressão mais evidente destas enzimas em idades mais tardias para a catepsina S e mais precoce para a catepsina H, dando espaço para atuação de outras mol[éculas estimuladoras de crescimento nas idades em que eslas estão ausentes. Os inibidores de cisteíno-proteases E-64 e Leupeptin adicionados ao meio de cultura de rins embrionários em cultivo determinou alterações significativas de crescimento naqueles órgãos. A aplicação de modelos já bem estabelecidos de tubulogênese, como a cultura de células MDCK e IMCD em gel de colágeno tipo I, com meios tratados com os fatores de crescimento EGF e HGH isoladamente ou em associação aos inibidores E-64 e Leupeptin foi providente na medida em se observou redução significante na ramificação induzida pelo HGF nos ensaios com o E-64 em ambas linhagens celulares. Diferentemente, o Leupeptin causou alteração apenas na complexidade da ramificação por provável inibição dos processos celulares. Este estudo sugere que, através das técnicas de rtPCR, cultivo de órgão embrionário e modelo de nefrogênese com cultura tridimensional de células MDCK e IMCD, as catepsinas S e H estão fortemente envolvidas no evento de tubulogênese induzido por fatores de crecimento específicos