O fenômeno da antecipaçäo genética e a expansäo de repetiçöes trinucleotídicas no transtorno afetivo bipolar: análise de ligaçäo e associaçäo dos loci erda1, sef2-1b, hskca3 e mab21L com o transtorno afetivo bipolar / The Phenomenon of genetic anticipation and the trinucleotide repeats expansions in the bipolar affective disorder: linkage and association analysis of the erda1, sef2-1b, hSKCa3 and mab21L loci with the bipolar affective disorder

RESUMO

No início da década de 1990 descobriu-se que a base biológica para o fenômeno de antecipação genética era a expansão de grupos de três nucleotídios repetidos. Estudos recentes relatam a presença do fenômeno de antecipação em famílias com múltiplos afetados pelo transtorno afetivo bipolar. Ao lado disso, investigações independentes utilizando o método RED (Repeat Expansion Detection) - uma estratégia que detecta expansões de repetições trinucleotídicas no DNA genômico sem identificar sua localização têm mostrado associação entre este distúrbio do humor e longas repetições da seqüência nucleotídica CAG. No presente estudo testamos a hipótese de que loci com repetições CAG estão envolvidos na vulnerabilidade genética ao transtorno afetivo bipolar. Assim, analisamos o comprimento das repetições CAG presentes em quatro loci o locus ERDA1 na região cromossômica l7q2l.3 ao qual tem sido atribuído a maioria das repetições CAG detectadas pelo RED, o locus SEF2-lb que situa-se na região l8q21.1, onde há relatos positivos de ligação e os loci hSKCa3 (região lq2l) e MAB2lL (região l3ql3), ambos devido a função do gene na qual as repetições residem. Inicialmente, investigamos quatorze famílias brasileiras com múltiplos afetados pelo transtorno bipolar, que tiveram a idade de início da doença comparada na 1ª e na 2ª geração revelando antecipação. Averiguamos ainda uma amostra de 115 pacientes bipolares não-aparentados e 196 indivíduos controles. As repetições CAG foram amplificadas por PCR, os produtos submetidos a eletroforese em gel de poliacrilamida e as bandas visualizadas após coloração com SYBR gold em aparelho de fluorescência direta (Fluorimager system), possibilitando definir os alelos de acordo com o tamanho da seqüência CAG. O teste ampliado para desequilíbrio de transmissão (ETDT) que utilizamos nas famílias não evidenciou transmissão preferencial de nenhum dos alelos para os membros afetados (ERDA1 X2=11,05/p=O,l36; SEF2-lb X2=4,42/p=O,62; hSKCa3 X2=0,88/p=O,92; MAB2lL X2=5,76/p=O,45). A análise de ligação por testes paramétricos e não-paramétricos excluiu ligação entre qualquer dos quatro loci e a doença bipolar (ERDA1 lod score= -lO,78/ p=O,27; SEF2-lb lod score= -5,87/p=O,6; hSKCa3 lod score=-2,Ol/p=O,59; MAB2lL lod score=-12,46/p=O,83). No estudo caso-controle, a distribuição dos alelos entre pacientes bipolares e controles foi comparada através do teste U de Mann-Whitney e não demonstrou diferenças significativas ...(au)