Sobrevivência de blastocistos Mus domesticus domesticus vitrificados em meio contendo 9.0M de etileno glicol na presença de sacarose / Survival rate of Mus domesticus domesticus blastocysts vitrified in 9.0M of ethylene glycol with sucrose

RESUMO

Os experimentos realizados tiveram como objetivo determinar a taxa de sobrevivência in vitro e in vivo de blastocistos Mus domesticus domesticus vitrificados em meio contendo 9,0M de etileno glicol e 0,3M de sacarose. As soluçöes testadas foram denominadas de I e IS, quando a adiçäo do crioprotetor foi realizada em duas etapas, e II e IIS, quando a adiçäo deste foi realizada em apenas uma etapa. Na soluçäo de vitrificaçäo I, foi realizada inicialmente uma desidrataçäo prévia dos embriöes por um período de 2 minutos em soluçäo de 1,8M de EG em PBS + 6 por cento de BSA e, logo após, eles foram transferidos, por um período de 30 segundos, para a soluçäo composta por uma associaçäo de 9,0M de EG em PBS + 6 por cento de BSA, antes da imersäo em nitrogênio líquido. Na soluçäo de vitrificaçäo IS, o procedimento foi idêntico ao da soluçäo I, apenas com o acréscimo de 0,3M de sacarose às soluçöes crioprotetoras. Na soluçäo de vitrificaçäo II, os embriöes foram expostos diretamente a uma soluçäo composta por uma associaçäo de 9,0M de EG em PBS + 6 por cento de BSA, onde permaneciam por 30 segundos antes da imersäo em nitrogênio líquido. Na soluçäo de vitrificaçäo IIS, o procedimento foi idêntico ao da soluçäo II, apenas com a adiçäo de 0,3M de sacarose à soluçäo crioprotetora. No experimento I, foi determinada a taxa de sobrevivência de 299 blastocistos após a exposiçäo às soluçöes crioprotetoras, näo sendo observada diferença estatística entre os tratamentos e o grupo controle. O experimento II permitiu avaliar a sobrevivência embrionária in vitro (taxa de eclosäo) após a vitrificaçäo de 330 blastocistos, onde as soluçöes I e IS foram estatisticamente superiores às demais, apresentando taxas de eclosäo de 49 e 40 por cento, respectivamente. No experimento III, realizou-se a transferência de 141 blastocistos vitrificados, após a exposiçäo às soluçöes I e IS, para fêmeas receptoras. Näo houve diferenças estatísticas entre as taxas de sobrevivência embrionária determinadas aos 14 dias de prenhez, tanto para implantaçöes (37 e 32 por cento) quanto para fetos (27 e 27 por cento), respectivamente. A presença de sacarose na soluçäo de vitrificaçäo näo proporcionou uma maior sobrevivência de blastocistos Mus domesticus domesticus vitrificados em uma soluçäo contendo 9,0M EG.