Estudo da laminina sérica e de sua deposiçäo no fígado de ratos com fibrose hepática induzida por tetracloreto de carbono / Serum laminin and its deposition in the liver of rats with carbon tetrachloride-induced fibrosis

RESUMO

Laminina sérica tem sido correlacionada com hipertensão portal e capilarização dos sinusóides nas hepatopatias crônicas. Entretanto, pouco se conhece sobre sua dinâmica nas doenças hepáticas. Neste trabalho, objetivou-se estudar níveis séricos e deposição de laminina no tecido hepático, correlacioná-la com graus de fibrose hepática e hipertensão portal experimentalmente induzidas. 59 Ratos albinos Wistar foram mantidos como controles ou tratados com solução 8 por cento de CCl4. Entre a 6 a e 16 a semana de experimento, 16 controles e 33 tratados COM CCl4 foram sacrificados, submetidos a cateterização da veia porta, medida da pressão portal em coluna líquida e coleta de sangue da veia porta, veia supra-hepática e veia femoral. Dez ratos (quatro controles e seis tratados) foram submetidos a coleta de sangue da aorta abdominal, veia porta e veia supra-hepática. Fragmentos de fígado foram fixados em glutaraldeído 2 por cento para microscopia eletrônica, congelados em nitrogênio líquido para imunohistoquímica e fixados em formol para microscopia óptica. A fibrose hepática foi classificada como fibrose perivenular, fibrose septal completa, incompleta e cirrose. Determinação da concentração de laminina circulante foi realizada pela técnica de ensaio imunoenzimático com anticorpo desenvolvido a partir de laminina isolada de tumor Engelbreth-Holm-Swarm, purificado em coluna de afinidade. O anticorpo foi também utilizado para imunohistoquímica, com anticorpo secundário biotinilado (titulação 1/500). A microscopia eletrônica mostrou alterações estruturais na fibrose septal e principalmente na cirrose, com substância amorfa eletrondensa depositada no espaço de Disse e desaparecimento das fenestrações sinusoidais. A pressão portal correlacionou-se com grau de fibrose hepática (r = O,82; P < O,OO1; n=45) e seus níveis nos grupos fibrose septal (1O,8 + 1,2 cmH2O) e cirrose (l3,6 + 3,1 CmH2O) foram estatisticamente superiores aos grupos controle (7,9 + 1,5 cmH2O) e flbrose perivenular (9,1 + O,8 cmH2O). A concentração de laminina no sangue periférico do grupo cirrose (40,0 + 18,7 mg/dL) foi significantemente superior aos grupos controle (l3,8 + 12,1 mg/dL), fibrose perivenular (l9,l + 15,5 mg/dL) e fibrose septal (22,2 + 27,0 mg/dL). A laminina circulante correlacionou-se com grau de flbrose hepática (r O,59; P < O,01; n= 49) e em menor grau com a pressão portal (r = O,29; P O,05; n=45). Houve correlação estatisticamente significante entre as ...(au)