Substratos e inibidores para a calicreína tissular humana / Human tissue kallikrein substrates and inhibitors

RESUMO

Este trabalho focaliza o sistema calicreína cinina, do ponto de vista da - interaçao da calicreína tissular humana com seu inibidor proteico do tipo serpina, denominado calistatina. Para tanto, o mapeamento dos determinantes de especificidade da calicreína tissular humana foram explorados através do uso de substratos peptídicos sintéticos com supressao intramolecular de fluorescência. Este estudo, associado a informaçoes anteriores a cerca da especificidade desta enzima sobre seqüências derivadas do cininogênio humano foram capazes de gerar inibidores competitivos com alta afinidade, contendo inclusive aminoácidos nao naturais. Além disso, o estudo da calistatina também foi abordado, procurando-se determinar alguns dos fatores que podem regular sua atividade fisiológica, como a interaçao com heparina e a sua destruiçao por outras proteases. Os resultados apresentados indicam que o centro reativo da calistatina foi capaz de servir de molde para a síntese de inibidores eficazes para a calicreína tissular humana e que pequenos peptídeos, contendo em sua seqüência aminoácido nao naturais apresentam um caminho potencial para o desenvolvimento de inibidores peptídicos específicos. Estudamos ainda a interaçao da heparina com calistatina e apresentamos evidencias do mecanismo de sua perda de funçao inibitória do complexo. Finalmente, abordamos a da calistatina e da antiquimotripsina pela catepsina D, que além evidenciar um possível papel desta enzima no controle destas serpinas, coletamos informaçoes relevantes sobre a especificidade da catepsina D