Construçäo de bibliotecas de cDNA com PCR de baixa estringência e primers híbridos e clonagem de uma apirase de Schistosoma mansoni / Construction of cDNA libraries with low stringency RT-PCR and hybrid primers and cloning of an apyrase of Schistosoma mansoni

RESUMO

Este trabalho mostrou a purificação de uma apirase em extratos de tegumentos de vermes adultos de S. mansoni com razão de hidrólise de ADP/ATP aproximadamente 2. Análise da amostra por MALDI-TOF evidenciou a presença de helicase e carboxilesterase, sendo que a atividade de hidrólise de ADP ainda não foi descrita para estas proteínas. Através de ®Western blot¼ mostrou-se que a proteína purificada não tem epítopos reconhecíveis por anticorpo anti-apirase de batata, e que a imunoreatividade cruzada com apirase da família CD39 está presente na fração insolúvel que não foi utilizada no processo de purificação. Esta tese caracteriza também a utilização de ®primers¼ consenso degenerados na construção de bibliotecas de cDNA com PCR de baixa estringência...