Avaliaçäo de três métodos de extraçäo de DNA de material parafinado para amplificaçäo de DNA genômico pela técnica da PCR / Evaluation of three methods od DNA extraction from paraffin-embedded material for the amplification of genomic DNA by means of the PCR technique

RESUMO

Existem na literatura vários protocolos para extraçäo de DNA genômico a partir de material fixado em formal e embebido em parafina. A obtençäo de DNA genômico é importante para realizaçäo de experimentos em biologia molecular, dentre eles a PCR. Este trabalho teve por objetivo otimizar a extraçäo de DNA genômico a partir de material fixado (hiperplasia fibrosa inflamatória) e näo-fixado (mucosa bucal normal) em formol, comparando-se três metodologias diferentes fenol com digestäo enzimática, partículas de sílica com e sem digestäo enzimática. Para amplificaçäo do DNA pela técnica da PCR, utilizou-se iniciadores para o éxon 7 da citoqueratina tipo 14. O sucesso da amplificaçäo foi verificado pela eletroforese do produto em gel de poliacrilamida 8 por cento contendo glicerol 5 por cento corado com prata. Obteve-se amplificaçäo do DNA genômico extraído com fenol/digestäo enzimática e com partículas de sílica/disgestäo enzimática, para ambos tecidos utilizados. O método padronizado tem potencial para auxiliar no diagnóstico histopatológico, assim como no estudo retrospectivo de material de arquivo