Papel dos proteoglicanos de heparam sulfato de matriz e superfície na divisäo celular / The role of proteoglycans of cell surface and extracellular matrx on the cell proliferation, using as a experiental model endothelial cells and melanoma

RESUMO

O presente trabalho visa o estudo do papel dos proteoglicanos (PGs) da superfície e matriz extracelular (MEC) na divisão celular empregando como modelo células endoteliais e de melanoma em cultura. O éster de forbol PMA, um ativador da PKC, apresentou um duplo efeito no crescimento de células endoteliais ação mitogénica no início de G1 e ação antiproliferativa ao final de G1, bloqueando a passagem de G1 para a fase S. Por outro lado, PMA estimulou especificamente a síntese de PGHS de maneira dose-dependente em Gol Gl. Além do PMA, somente o ionóforo de Ca2+ foi capaz de induzir o aumento na síntese de proteoglicano de heparam sulfato (PGHS). De maneira semelhante ao PMA, a bradicinina (BK) estimulou a síntese de PGHS e também bloqueou o ciclo celular. O conjunto de dados sugere o envolvimento de diversas isoformas da PKC nestes dois processos, em especial as isoformas de PKC dependentes de cálcio. Utilizando n-butanol, um inibidor da PKC, observamos que a biossíntese de PGHS não foi totalmente abolida, indicando a existência de outra via para a biossíntese de PGs, independente da PKC. Esta outra via poderia ser representada por NO, pois dados da literatura mostram que BK interfere na produção deste composto. A importância dos PGs na proliferação celular foi estudada empregando-se xilosídeos ligados a diferentes agliconas, que atuam como moléculas aceptoras para a biossíntese dos glicosaminoglícanos (GAG). Dentre todos os compostos testados, o-nitrofenii-P-D-xilosídeo é o melhor aceptor para a síntese de HS sendo o único composto capaz de alterar o ciclo celular, por bloquear a entrada do ciclo na fase S. Este efeito é similar ao apresentado pelo tratamento de células endoteliais com PMA e BK. Estudando PGs de células de melanoma e expressão de glicosidases e proteases, foi possível demonstrar que as células com maior potencial invasivo, e portanto maior capacidade migratória, apresentaram aumento na excreção de cisteínoproteases (tipo tiol). Por outro lado, as células de menor potencial metastático, apresentam maior atividade das exoglicosidases...(au)