Avaliação da fidelidade genotípica por marcadores RAPDs de brotaçöes de pereira (Pyrus communis L. ) cv. Carrick, regeneradas in vitro / Evaluation of the genotypic fidelity by RAPD markers of pear shoots (Pyrus communis L. ) cv. Carrick, in vitro regenerated

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi avaliar a fidelidade genotípica de brotaçöes de pereira (Pyrus communis L.) cultivar Carrick, regeneradas in vitro, utilizando marcadores RAPDs. O DNA genômico foi extraído de folhas oriundas das brotaçöes de pereira regeneradas a partir de diferentes tratamentos e de plantas matrizes micropropagadas (planta controle), utilizando-se o protocolo descrito por FERREIRA & GRATTAPAGLIA (1996). Para triagem dos primers foram utilizados os kits OPAN, OPA e OPF (Operon Technologies, Inc.) e, destes, foram escolhidos sete primers OPAN-03, OPAN-14, OPAN-15, OPAN-16, OPA-02, OPA-08 e OPF-04. A separaçäo dos produtos da amplificaçäo foi realizada através de eletroforese horizontal em gel de agarose 1,2 por cento, corado com brometo de etídio. Após a corrida, os géis foram visualizados sobre um transiluminador de luz ultravioleta e fotografados com câmara Polaroid para registro dos dados. A ausência ou adiçäo de uma ou mais bandas comparativamente ao padräo da planta matriz (planta controle) foi considerado variaçäo somaclonal. Dos 66 fragmentos produzidos pelos sete primers, observou-se 100 por cento de bandas monomórficas, indicando que nenhum dos primers utilizados detectou variaçäo somaclonal nas brotaçöes regeneradas