Padronizaçäo da técnica imunoenzimática (ELISA) de captura para o estudo do hábito alimentar de Dípteros da subfamília Phlebotominae / Standardizing a enzime-linked immunossorbent assay (ELISA) to be employed in studies related to food habits of Diptera

RESUMO

A Identificaçäo de sangue ingerido pelos insetos constitui-se em importante parâmetro para elucidar à transmissäo de zoonoses, dentre elas, as leishmanioses. Dentre alguns métodos empregados para esclarecer a atraçäo de vetores por animais que possam atuar como reservatórios dessas parasitoses, destacam-se os métodos sorológicos. O presente estudo teve como objetivo, padronizar a técnica imunoenzimática (ELISA) de captura, a ser utilizada em pesquisas relacionadas à atraçäo de vetores das leishmanioses. Para a padronizaçäo da técnica, foram utilizadas fêmeas de flebotomíneos ingurgitadas da espécie Lutzomyia longipalpis, criadas em laboratório em laboratório em temperatura ambiente de 25± 2°C, alimentadas experimentalmente em rato e com a utilizaçäo de reagentes disponíveis no comércio. Em vista da alta sensibilidade, favorecida pelo sistema avidina-biotina, quantificou-se sangue ingerido para amostras com diferentes períodos de digestäo, utilizando-se a menos concentraçäo de anti-soro. A técnica pôde prover a realizaçäo de pelo menos noventa testes em duplicata para a determinaçäo de sangue recém-ingerido. Para todas as amostras com períodos de 12 e 24 horas pós-ingestäo. foi constatada a presença de sangue, observando-se diferença significativa entre os respectivos títulos com a possibilidade de detecçäo de sangue até 48 horas e observada a ausência total de reaçäo após 72 horas da ingestäo de sangue.