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The role of calcium, calcium-activated K+ channels, and tyrosine/kinase in psoralen-evoked responses in human melanoma cells
Isoldi, M. C; Pereira, E. A; Visconti, M. A; Castrucci, A. M. L.
  • Isoldi, M. C; Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências. Departamento de Fisiologia. São Paulo. BR
  • Pereira, E. A; Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências. Departamento de Fisiologia. São Paulo. BR
  • Visconti, M. A; Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências. Departamento de Fisiologia. São Paulo. BR
  • Castrucci, A. M. L; Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências. Departamento de Fisiologia. São Paulo. BR
Braz. j. med. biol. res ; 37(4): 559-568, Apr. 2004. ilus, tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-357106
RESUMO
8-Methoxy psoralen (8-MOP) exerts a short-term (24 h) mitogenic action, and a long-term (48-72 h) anti-proliferative and melanogenic action on two human melanoma cell lines, SK-Mel 28 and C32TG. An increase of intracellular calcium concentration was observed by spectrofluorometry immediately after the addition of 0.1 mM 8-MOP to both cell lines, previously incubated with calcium probe fluo-3 AM (5 µM). The intracellular Ca2+ chelator BAPTA/AM (1 µM) blocked both early (mitogenic) and late (anti-proliferative and melanogenic) 8-MOP effects on both cell lines, thus revealing the importance of the calcium signal in both short- and long-term 8-MOP-evoked responses. Long-term biological assays with 5 and 10 mM tetraethylammonium chloride (TEA, an inhibitor of Ca2+-dependent K+ channels) did not affect the responses to psoralen; however, in 24-h assays 10 mM TEA blocked the proliferative peak, indicating a modulation of Ca2+-dependent K+ channels by 8-MOP. No alteration of cAMP basal levels or forskolin-stimulated cAMP levels was promoted by 8-MOP in SK-Mel 28 cells, as determined by radioimmunoassay. However, in C32TG cells forskolin-stimulated cAMP levels were further increased in the presence of 8-MOP. In addition, assays with 1 µM protein kinase C and calcium/calmodulin-dependent kinase inhibitors, Ro 31-8220 and KN-93, respectively, excluded the participation of these kinases in the responses evoked by 8-MOP. Western blot with antibodies anti-phosphotyrosine indicated a 92 percent increase of the phosphorylated state of a 43-kDa band, suggesting that the phosphorylation of this protein is a component of the cascade that leads to the increase of tyrosinase activity.
Assuntos
Texto completo: DisponíveL Índice: LILACS (Américas) Assunto principal: Proteínas Tirosina Quinases / Canais de Potássio / Fármacos Fotossensibilizantes / Melanoma / Metoxaleno Limite: Humanos Idioma: Inglês Revista: Braz. j. med. biol. res Assunto da revista: Biologia / Medicina Ano de publicação: 2004 Tipo de documento: Artigo / Documento de projeto País de afiliação: Brasil Instituição/País de afiliação: Universidade de São Paulo/BR

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