Development of a polymerase chain reaction and its comparison with agar gel immunodiffusion test in the detection of bovine leukemia virus infection

RESUMO

A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para a detecção do vírus da leucemia bovina (VLB) em leucócitos periféricos de bovinos infectados. Os iniciadores utilizados foram construídos para amplificar uma parte do gene env do VLB. Os produtos da PCR foram analisados por eletroforese em gel de agarose corados por brometo de etídeo. A especificidade analítica da PCR foi confirmada por restrição enzimática dos produtos da reação com Bam HI e também pela análise da seqüência de três amostras. Sessenta e cinco animais foram testados para a presença de anticorpos anti-VLB, pela imunodifusão em gel de agar (IDGA) e pela PCR, para detecção direta do VLB. Houve 73,80 por cento de concordância entre os dois testes. Quatro animais positivos na IDGA foram PCR negativos, enquanto 13 animais negativos na IDGA foram positivos na PCR. A sensibilidade diagnóstica obtida foi de 0,87 e a especificidade diagnóstica 0,62. A PCR desenvolvida pode ser uma ferramenta complementar no diagnóstico de infecções causadas pelo VLB, mas deve ter sua sensibilidade diagnóstica melhorada.