Detección rápida de resistencia a drogas en Mycobacterium tuberculosis mediante PCR-SSCP y PCR-heteroduplex / Quick detection of Mycobacterium tuberculosis drug resistance using PCR-SSCP and PCR-heteroduplex

RESUMEN

Objetivo: Detectar tempranamente la susceptibilidad a las drogas antituberculosas rifampicina e isoniacida mediante PCR y electroforesis conformacional. Materiales y métodos: Se implementaron dos ensayos de amplificación de los genes rpoB y katG y mediante Heteroduplex y SSCP se determino la susceptibilidad antituberculosa de 31 muestras clínicas procedentes de pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar baciloscopia positiva. La caracterización fenotípica de la susceptibilidad, se realizó empleando el método de las proporciones. Resultados: Los ensayos de PCR detectaron hasta 2,5 pg de ADN genómico de M. tuberculosis; no amplificando ADN de otras micobacterias y bacterias comunes de la flora bucal. Se encontró una concordancia general entre la detección molecular y convencional de la susceptibilidad a rifampicina e isoniacida de 96.7 por ciento y 83,9 por ciento (p<0,05), respectivamente. Sin embargo sólo en pacientes con antecedente de tratamiento se presentó una concordancia del 100 por ciento y 90,9 por ciento (p<0,05) para rifampicina e isoniacida, respectivamente. Además, este sistema de detección de resistencia puede emitir resultados 48 horas después de la recepción de la muestra clínica. Conclusiones: Estos sistemas se presentan como una excelente alternativa para la identificación temprana de pacientes infectados con bacilos de M. tuberculosis drogoresistentes. Potencialmente se podrán dirigir óptimos y oportunos esquemas terapéuticos que contribuiran con el control y prevención de la transmisión de cepas multidrogo-resistentes que afectan en gran medidad a la salud pública d nuestro país