Lesão de sarcolema em músculo respiratório e periférico de ratos induzida pela exposição à fumaça de cigarro / Sarcolemmal damage in respiratory and peripheral muscles of rats induced by cigarette smoke exposure

RESUMO

Introdução: A deterioração muscular periférica é uma condição progressiva da DPOC e diversos fatores estão relacionados ao seu aparecimento e gravidade, entretanto o tabagismo nunca havia sido estudado como potencial fator. Objetivos: Investigar se a exposição aguda (2 horas) e sub-aguda (5 dias e 25 dias) à fumaça de cigarro causa aumento na permeabilidade do sarcolema elou na proporção e morfometria das fibras dos músculos diaphragma e vasto lateral de ratos; validar um modelo de exposição à fumaça de cigarro. Material e Métodos: O modelo de exposição ao cigarro é constituído de uma câmara de acrílico com capacidade para expor oito ratos simultaneamente; 21 ratos foram expostos uma única vez por duas horas e sacrificados imediatamente (0 h; n = 4), após duas (2 h; n = 4), quatro (4 h; n = 4), 24 (24 h; n = 4) e 48 horas (48 h; n = 5) da exposição. Quatro ratos serviram de controle. A câmara recebia a fumaça de cigarro (50-100ml/min) e ar comprimido (5L/min) para manter uma concentração de monóxido de carbono entre 45-55 ppm no seu interior. Analisou-se a carboxihemoglobina (HbCO) e a cotinina sérica dos animais. Os efeitos do cigarro nos músculos diaphragma e vasto lateral foram avaliados em 48 ratos, em modelos de exposição de duas horas (E2h; n=16), de cinco dias (E5d; n=8) e de 25 dias (E25d; n=8). Cada grupo tinha o seu respectivo grupo controle (C2h, C5d e C25d), composto de quatro ratos cada. Após 24 horas do término das exposições os ratos foram sacrificados e seus músculos retirados para análise. Permeabilidade do sarcolema foi avaliado com o anticorpo anti-albumina, considerado lesão quando eram de grau 2 e 3. Proporção e morfometria de fibras foram analisados com anti-corpos monoclonais para miosina I e II. Resultados: No modelo de validação do método, houve aumento da HbCO imediatamente após a exposição (3 por cento) comparado ao controle (0 por cento) e da cotinina nos tempos 0 h, 2 h e 4 h após a exposição (17 ± 4, 12 ± 9 e 13 ± 6, respectivamente, vs. 0 ng/ml no grupo controle). No diaphragma e no vasto lateral as médias fibras com lesões de sarcolema foram 41,3 ± 19,2 e 18,8 ± 13,6 (E2h), 51,9 ± 26,5 e 17,8 ± 15,0 por cento (E5d), 33,3 ± 23,3 e 10,0 ± 10,5 por cento (E25d), respectivamente, comparado a 17,9 ± 15,5 e 4,1 ± 4,7 por cento no grupo controle..