Caracterização dos mecanismos de resistência aos carbapenens e análise da similaridade genética de amostras de Acinetobacter spp. isoladas do Hospital São Paulo no período de 1993 a 2001 / Characterization of the mechanisms of resistence to carbapenens and analysis of genetic similarity among Acinebacter spp. isolated from Hospital São Paulo during the period 1993 to 2001

RESUMO

Objetivo: O presente estudo teve como objetivo caracterizar os mecanismos de resistência aos carbapenens e analisar a similaridade genética de amostras de Acinetobacter spp. isoladas em diferentes unidades clínicas do Hospital São Paulo no período de 1993 a 2001. Métodos: Setenta e três amostras de Acinetobacter spp. com sensibilidade reduzida aos carbapenens confirmadas pelo método de disco difusão foram avaliadas. Todas as amostras foras submetidas ao testes de sensibilidade ao agentes antimicrobianos pela metodologia de microdiluição em caldo de acordo com a padronização do NCCLS. Para a pesquisa fenotípica da produção de metalo -lactamase (ML) do grupo 3, classe molecular B, foi utilizado como triagem o teste de aproximação de discos utilizando como substrados imipenem e ceftazidima e como inibidores o EDTA e o ácido 2-mercaptopropiônico. A confirmação fenotípica da produção de ML foi realizada pela metodologia de Etest® ML. A detecção dos genes blaIMP, blaVIM, blaSPM, e blaOXA-23 a OXA-27 foi realizada pela técnica de PCR. Os respectivos amplicons obtidos foram clivados com as enzimas de restrição EcoRI, BamHI e HindIII e selecionados posteriormente para o seqüenciamento. Outros mecanismos de resistência foram pesquisados em 21 amostras de Acinetobacter spp. com ribogrupos distintos. A pesquisa fenotípica da hiperprodução de AmpC e da presença de bomba de efluxo, foi realizada pela técnica de diluição em ágar utilizando-se -lactâmicos com e sem inibidores SYN 2190 e reserpina respectivamente. A avaliação do perfil de proteínas de membrana externa foi realizada pela técnica de SDS-PAGE. A similaridade genética entre as 73 amostras resistentes aos carbapenens foi avaliada pela técnica da ribotipagem automatizada. Resultados: A polimixina E (MIC50,  0,5 g/ml; 97,3 por cento de sensibilidade), ampicilina-sulbactam (MIC50,  8,0 g/ml; 74 por cento de sensibilidade) e gatifloxacina (MIC50,  2,0 g/ml; 53,4 por cento de sensibilidade) foram os antimicrobianos com maior atividade in vitro contra amostras de Acinetobacter spp. estudadas. Quarenta das 73 (54,8 por cento) amostras de Acinetobacter spp. foram categorizadas como produtoras de ML pelos testes fenotípicos utilizados para detecção da produção dessas enzimas...(au)