Determinación de la concentración inhibitoria mínima en cepas de Mycobacterium tuberculosis mediante la técnica colorimétrica del alarmar azul / MIC determination of Mycobacterium tuberculosis strains using standardized blue Alamar assay colorimetric technique

RESUMEN

Objetivo: estandarizar y optimizar la t¨¦cnica colorimétrica de Alamar azul y compararla con el método de referencia de las proporciones múltiples. Materiales y métodos: se utilizaron 11 cepas de referencia de M. tuberculosis, con las cuales se estandarizó la técnica del Alarmar azul, para cuatro medicamentos antituberculosos estreptomicina, isoniacida, rifampicina y etamutol. Se determinó la reproducibilidad de la técnica. Se compararon los resultados obtenidos en el método de referencia de las proporciones múltiples, con las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) obtenidas en la técnica del Alamar azul. Se propusieron puntos de corte de sensibilidad y resistencia para los medicamentos estudiados. Resultados: la técnica del Alarmar azul quedó estandarizada en los siguientes aspectos utilización del inóculo a partir de medio s¨®lido (Owaga-Kudoh), a una concentración de 125, realizando las diluciones de los antibióticos fuera de la placa. Las determinaciones de la CIM se obtuvieron entre 8 y 10 días. Los puntos de corte de sensibilidad y resisitencia, propuestos para estreptomicina fueron ¡Ü 1.0¦Ìg/ml y ¡Ý 2.0 ¦Ìg/ml, para isoniacida; ¡Ü 0.25¦Ìg/ml y ¡Ý 1.0 ¦Ìg/ml, para rifampicina; ¡Ü 0.25¦Ìg/ml y ¡Ý 1.0 ¦Ìg/ml, para etambutol; ¡Ü 8.0¦Ìg/ml y ¡Ý 16.0 ¦Ìg/ml, respectivamente. La concordancia total entre los dos métodos estudiados fue del 95 por ciento para todas las drogas estudiadas. Conclusiones: la técnica colorimétrica del Alamar azul es rápida, efectiva y económica para la detección temprana de multirresistencia, lo cual representa una ayuda valiosa especialmente en pacientes de alto riesgo de tuberculosis multirresistente y podría implementarse para apoyo de programas de vigilancia y control de la tuberculosis