Superfícies de titânio com diferentes rugosidades e quantidades de alumina: caracterização e biocompatibilidade "in vitro" utilizando-se osteoblastos derivados de osso alveolar humano / Titanium surfaces with differents rugosities an alumina's quantities: in vitro characterization and biocompatibility using human alveolar bone cells

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de superfícies de titânio (Ti), com diferentes rugosidades e quantidades de alumina, na adesão, proliferação e diferenciação de osteoblastos derivados de osso alveolar humano (OAH), e na formação de matriz mineralizada. Amostras de Ti foram lixadas (lixa Sic 600) ou jateadas com alumina (grãos de 65 um e pressão de 414 kpa) e submetidas a ataque duplo com ácido fluorídrico (HF) a 4% por 13 s ou 60 s, seguido de tratamento com solução de HF a 4% e H2O2 a 8%, por 15 s. Cinco superfícies foram avaliadas (L - lixada, LI - lixada e atacada por HF por 60 s, J -jateada, Jl - jateada e atacada por HF por 13 s e J2 - jateada e atacada por HF por 60 s). OAHs foram isolados e cultivados sobre 4 amostras de cada superfícies (2 x 10 células/poço). O número de células aderidas, após 24 h, foi contado em um hemocitômetro. A viabilidade celular, aos 10 dias, foi avaliada pelo corante azul da tripan. A proliferação celular foi calculada pelo "doubling time" (tempo necessário para o número de células dobrar entre 1 e 10 dias). A atividade de fosfatase alcalina (ALP) e o conteúdo de proteína total (CPT) foram avaliados, respectivamente, pela liberação de timolftaleína e pelo método modificado por LOWRY et al.60, aos 7, 14 e 21 dias. A formação de matriz mineralizada foi estudada aos 21 dias de cultura, utilizando-se o corante vermelho de alizarina. A presença do Ca e P foi confirmada pela análise semiquantitativa (EDS). A área média ocupada pela matriz mineralizada foi estabelecida pelo KS400. As superfícies apresentaram rugosidades estatisticamente distintas (p< 0.001 ANOVA), em micrômetros (L= 0.25 ±0.06, Ll= 0.52 ±0.04, J= 1.00 ±0.07, Jl= 0.98 ±0.03 e J2= 0.99 ±0.08). O alumínio foi visualizado nas superfícies J e Jl, e confirmado pelo EDS. A análise digital com o programa KS400 indicou que a área média ocupada pela alumina foi maior na superfície J do que na superfície Jl (respectivamente, 9,72% ±0,50 vs 0,22%.±0,13...