Identificação molecular de cepas do complexo mycobacterium tuberculosis e detecção de resistência a antibióticos / Tuberculosis molecular identification of cepas of the complex mycobacterium and detention of resistance the antibiotics

RESUMO

A tuberculose mata aproximadamente 3 milhões de pessoas no mundo a cada ano...Em nosso estudo, utilizamos duas abordagens moleculares, baseadas na reação de PCR,Single Strand Conformational Polymorphism-SSCP e Reverse Line Blot Hybridization-RLBH,para verificarmos genótipos mutantes e a freqüência de mutações no genoma de M. tuberculosis associadas à resistência a drogas, assim como avaliarmos a RLBH para a detecção rápida de resistência...Utilizando o SSCP, verificamos que a versão radioativa apresentou uma melhor resolução que a não radioativa.Na versão não-radioativa uma discordância foi observada (9,1 por cento) ao comparar os resultados com a análise por sequenciamento. Na RLBH, uma membrana contendo sondas para detecção de resistência a rifampicina, isoniazida, estreptomicina e etambutol foi avaliada em um estudo multi-cêntrico...Todas as cepas de M. bovis apresentaram o genótipo de sensível e entre as cepas resistentes de M. tuberculosis, 93 por cento apresentaram mutações na região de 157pb do gene rpoB.O Inno-LiPA (teste comercial),baseado em RLBH, para detecção de cepas de M. tuberculosis resistente a rifampicina,também foi analisado,apresentando uma sensibilidade de 97,6 por cento.Concluímos que a hibridação reversa tem a sensibilidade adequada para detectar cepas de M. tuberculosis resistentes a rifampicina e que os mecanismos relacionados à resistência a estreptomicina e isoniazida necessitam de uma melhor compreensão.Na parte deste estudo referente à variabilidade genética de cepas brasileiras de M. tuberculosis, avaliamos a composição de uma região especifica do Complexo M. tuberculosis, a Direct repeat(DR),pela técnica de spoligotyping.Através desta técnica determinamos os genótipos de cepas de M. tuberculosis, de pacientes, provenientes de 11 estados brasileiros e os comparamos com spoligotypes de 122 países depositados no Banco de Dados Internacional de spoligotypes. 80 por cento das cepas brasileiras pertencem às famílias dos spoligotypes...