Detección molecular de Dientamoeba fragilis en heces: eliminación de los inhibidores de la DNA polimerasa / Molecular detection of Dientamoeba fragilis in faeces: removal of DNA polymerase inhibitors
Parasitol. latinoam
; 61(3/4): 146-151, dic. 2006. ilus
Article
em Es
| LILACS
| ID: lil-453324
Biblioteca responsável:
CL1.1
RESUMEN
Se realizó un estudio de purificación del DNA de los trofozoitos de Dientamoeba fragilis a partir de muestras fecales humanas congeladas, no fijadas en formol, y con elevadas concentraciones de inhibidores de la DNA polimerasa. Para tal fin, se utilizaron columnas ("spin-columns") disponibles en el comercio. Esta metodología se comparó con una técnica tradicional de purificación con fenol/cloroformo. Ambos métodos fueron seguidos de la amplificación del DNA de D. fragilis por una "nested" PCR y posterior electroforesis en un gel de agarosa de los amplicones obtenidos. La extracción del DNA a partir de trofozoitos de D. fragilis - mediante el procedimiento de las columnas - produjo DNA de elevada calidad, libre de impurezas e inhibidores de la polimerasa. Por el contrario, con la técnica de fenol/cloroformo se observó la inhibición de la enzima, cuando se analizaron los productos de amplificación. Además, se confirmó que el agregado de SAF (solución de acetato de sodio - ácido acético - formol) a las muestras fecales afecta la integridad del DNA y como consecuencia impide su posterior amplificación.
Texto completo:
1
Índice:
LILACS
Assunto principal:
Reação em Cadeia da Polimerase
/
DNA de Protozoário
/
Dientamoeba
/
DNA Polimerase Dirigida por DNA
/
Fezes
Tipo de estudo:
Diagnostic_studies
Limite:
Humans
Idioma:
Es
Revista:
Parasitol. latinoam
/
Parasitología latinoamericana
Assunto da revista:
PARASITOLOGIA
Ano de publicação:
2006
Tipo de documento:
Article