Caracterização bioquímica e molecular de possíveis alvos terapêuticos do metabolismo de aminoácidos em Tripanossomatídeos / Biochemical and molecular characterization of possible tarepeutic targets against Trypanosomatids in the amino acid metabolism

RESUMO

Trypanosoma cruzi e Leishmania spp. são parasitas de grande relevância médica nas Américas e em países da Europa e Ásia. Esses organismos apresentam um ciclo de vida heteroxeno infectando hospedeiros vertebrados e invertebrados e, portanto, precisam se adaptar às diferentes condições ambientais. Dessa forma, diversas enzimas metabólicas, proteínas e transportadores participam no ajuste do metabolismo às condições ambientais e flutuações na disponibilidade de nutrientes do meio. Nesse aspecto, os aminoácidos são de importância vital para o metabolismo de tripanossomatídeos, porém pouco se sabe da dinâmica do transporte desses nutrientes para dentro da célula e existem algumas lacunas no estudo de algumas enzimas envolvidas no metabolismo de aminoácidos. Portanto, uma dos objetivos desse trabalho foi caracterizar bioquimicamente o transporte de L- glutamato, um aminoácido importante para o ciclo de vida desses organismos e as formas presentes no inseto de diversos tripanossomatídeos utilizam L-glutamato no metabolismo energético. A incorporação de glutamato ao longo do tempo foi estudada em formas promastigotas de Leishmania amazonensis, foi possível observar que a incorporação é saturável e apresenta uma faixa de linearidade durante os primeiros 120 segundos de incubação com aminoácido radioativamente marcado, atingindo um platô após 15 minutos...Os tripanossomatídeos são capazes de metabolizar L-glutamato para produção de energia, o fato de L. amazonensis incorporar L-glutamato com eficiência é um indicativo da relevância desse aminoácido no metabolismo desses parasitas. O outro objetivo do trabalho, se relaciona com a busca de alvos terapeêuticos em potencial no metabolismo de aminoácidos em Trypanosoma cruzi. A asparagina é de importância vital para a síntese correta de protéinas e para processos de modificações pós-traducionais como N-glicosilação...Além disso, também identificamos uma sequência codificante correspondente a enzima L-Asparaginase (L-Asp)...