Screening methods to determine antibacterial activity of natural products

ABSTRACT

The emergence of new infectious diseases, the resurgence of several infections that appeared to have been controlled and the increase in bacterial resistance have created the necessity for studies directed towards the development of new antimicrobials. Considering the failure to acquire new molecules with antimicrobial properties from microorganisms, the optimization for screening methods used for the identification of antimicrobials from other natural sources is of great importance. The objective of this study was to evaluate technical variants used in screening methods to determine antibacterial activity of natural products. Thus, a varied range of natural products of plant, fungi and lichen origin were tested against two bacterial species, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 25922, by two variants of the agar diffusion method (well and disc), two variants of the bioautographic method (direct and indirect) and by microdilution assay. We concluded that the well-variant of the diffusion method was more sensitive than the disc-variant, whilst the direct-variant of the bioautographic method exhibited a greater sensitivity if compared to indirect-variant. Bioautographic and diffusion techniques were found to have similar sensitivity; however the latter technique provided more suitable conditions for the microbial growth. In this study, we also discussed the best conditions for the determination of minimal inhibitory concentration.

RESUMO

Com o surgimento de novas doenças infecciosas, o reaparecimento de várias infecções que pareciam ter sido controladas, e o aumento da resistência bacteriana houve a necessidade de pesquisas dirigidas ao desenvolvimento de novos antimicrobianos. Levando em consideração a dificuldade de aquisição de novas moléculas com atividades antimicrobianas, a otimização de métodos de triagem usados na identificação de antimicrobianos de fontes naturais é de grande importância. O objetivo deste estudo foi avaliar variantes técnicas, usadas em métodos de triagem para determinar atividade antibacteriana de produtos naturais. Assim, vários produtos naturais, oriundos de plantas, fungos e líquens foram testados contra duas espécies bacterianas, Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Escherichia coli ATCC 25922, por duas variantes do método de difusão em ágar (poço e disco), duas variantes do método bioautográfico (direto e indireto) e por testes de microdiluição. Concluímos que a variante do método de difusão variante poço foi mais sensível do que a variante disco, enquanto que a variante direta do método bioautográfico exibiu uma sensibilidade maior, comparada com a variante indireta. As técnicas de bioautografia e difusão mostraram sensibilidades similares, embora a última tenha fornecido condições mais apropriadas para o crescimento bacteriano. Neste estudo, também discutimos as melhores condições para a determinação da concentração inibitória mínima.