Controle da síntese de prostaglandina F2 ALFA no endométrio bovino in vitro / In vitro control of prostaglandin F2a synthesis in bovine endometrium

RESUMO

A síntese de prostaglandina F2alfa(PGF2 alfa) endometrial, resulta de uma complexa cascata de eventos intracelulares que ocorrem de maneiraaltamente coordenada. A síntese de PGF2 alfa pode ser estimulada napresença da melitina e do forbol 12,13 dibutirato (PDBu). O objetivo do presente estudo foi verificar se a produção basal e a estimulação aguda de PGF2 alfa são dependentes da síntese de proteínas. No experimento 1, explantes obtidos de fêmeas bovinas (n=2), cíclicas, não lactantes, no dia 15 do ciclo estral foram incubados em quadruplicata, com meio de cultivo (KHB) ou KHB suplementado com PDBu 10(elevado a -6)M, melitina 10(elevado a -6)M ou melitina 10(elevado a-5)M. Amostras do meio foram coletadas 0 e 60 minutos após os tratamentos e as concentrações de PGF2 alfa foram mensuradas por radioimunoensaio. Com 60 minutos após os tratamentos houve aumento das concentrações médias de PGF2 alfa(P<0,06) em resposta ao tratamento com PDBu comparado ao grupo KHB e melitina. No experimento2, explantes endometriais de fêmeas bovinas (n=4), não gestantes,no 17° dia do ciclo estral, pesando de 80 a 100mg foram incubados em KHB suplementado com 0, 50, 100 ou 200mg/mL de CHX e 0 ou 100ng/mL de PDBu em um arranjo fatorial 2 x 4, em quadruplicata. Amostras do meio foram coletadas 0 e 60 minutos após os tratamentos e as concentrações de PGF2 alfa foram mensuradas por radioimunoensaio. A integridade dos explantes endometriais tratados com CHX foi avaliada por cortes histológicos. Foi observado aumento na produção de PGF2 alfa em resposta ao tratamento com PDBu(P<0,01), entretanto, não houve diferenças na produção de PGF2 alfa pelos tecidos tratados com diferentes concentrações de CHX, associadas ou não ao PDBu. A integridade histológica dos explantes foi preservada. Conclui-se que a produção basal e a estimulação aguda da síntese de PGF2 alfa não são dependentes da síntese de novas proteínas.

ABSTRACT

Synthesis of endometrial prostaglandin F2 a (PGF2 a) results from acomplex cascade of highly coordinated intracellular events. Production of PGF2 a can be stimulated by mellitin and 12, 13 phorbol dibutyrate(PDBu). Objective of the present study was to verify whether basal or stimulated synthesis of PGF2 a was dependent on de novo protein synthesis. In Experiment 1, endometrial explants from cyclic, non-lactating cross-bred beef cows (n=2) on day 15 of the estrous cycle were incubated in quadruplicate in culture KHB culture medium or medium supplemented with 10(involution-6)M PDBu, 10(involution-6)M melittin or 10(involution-5)M melittin. Medium samples were collected immediately and 60 minutes after treatment administration and concentration of PGF2 a in medium were measured by radioimmunoassay. Concentrations of PGF2a in medium were higher (P<0.06) after treatment with PDBu in comparison with control and melittin. In Experiment 2, endometrial explants from cyclic, non-lactating cross-bred beef cows (n=4) on day17 of the estrous cycle were incubated in quadruplicate in medium supplemented with 0, 50, 100 or 200mg cyclohexamide (CHX) and 0or 100ng/ml PDBu, in a 4 x 2 factorial arrangement. Medium sampleswere collected immediately and 60 minutes after administration of treatments and concentrations of PGF2 a measured by radioimmunoassay. Endometrial integrity was was evaluated by histology. Treatment with PDBu stimulated production of PGF2 a(P<0.01), regardless of concentration of CHX used. The CHX did not affect production of PGF2 a, either in the presence or absence of PDBu. Histological integrity of explants was preserved. It was concluded that both basal and PDBu-stimulated PGF2 a productionare not dependent on new protein sythesis.