Biosínteses de porfirinas en cultivos de explantes tisulares: condiciones óptimas / Porphyrins tiosynthesis in tissue culture explantation: optima conditions

RESUMEN

Se desarrolló un sistema de cultivo de tejido mediante el cual el explante permanece metabólicamente viable y estructuralmente intacto durante el tiempo de incubación. Se determinaron las condiciones óptimas para investigar la funcionalidad del camino biosintético del hemo usando ALA como precursor. Se observó una relación lineal entre el consumo de ALA y su concentración en el medio de cultivo. Tanto el consumo de ALA como las porfirinas acumuladas aumentaron hasta las 24 horas de incubación. El consumo de ALA fue máximo a 37-C, mientras que la acumulación de porfirinas fue mayor a 45-C. El consumo de ALA fue el mismo, ya sea que se incubara el tejido en oscuridad o en presencia de luz blanca, pero la acumulación de porfirinas fue mayor en condiciones de iluminación. La mayor formación de porfirinas y consumo de ALA se detectó cuando la masa de piel utilizada fue de aproximadamente 50 mg. No se detectó formación de Proto por cromatografía en las experiencias realizadas con ALA o Coprogen como precursores. Se desarrolló una modelo experimental que puede ser una herramienta importante para la evaluación del orígen de las porfirinas en piel y del mecanismo de fotosensibilidad cutánea en las porfirias. Mediante este modelo, se postula que, en piel, el camino biosintético del hemo es completo hasta la formación de Coprogen