Genetic diversity of Trypanosoma cruzi natural populations in Paraná state, southern Brazil

RESUMO

As características genéticas de doze cepas de Trypanosoma cruzi, isoladas de pacientes chagásicos crônicos, triatomíneos e reservatórios silvestres do estado do Paraná, sul do Brasil, foram estudadas, utilizando as técnicas de RAPD (DNA polimórfico amplificado randomicamente) e SSR-PCR (Reação em Cadeia da Polimerase ancorada em seqüências repetidas pequenas). As cepas Sylvio e Esmeraldo foram utilizadas como referências para T. cruzi I e II, respectivamente. O DNA foi amplificado, utilizando três diferentes iniciadores para o RAPD e o iniciador (CA)8RY para o SSR-PCR. A análise do gel foi feita visual e computacionalmente, baseada na presença e na ausência de bandas. Os fenogramas mostraram a existência de dois grupos genéticos distintos: um contendo as cepas isoladas de pacientes chagásicos crônicos, que gruparam com Esmeraldo, e o outro contendo as cepas isoladas de triatomíneos e reservatórios silvestres, que gruparam com Sylvio. A existência de dois grupos filogenéticos do T. cruzi no Estado do Paraná é descrita pela primeira vez.

ABSTRACT

The genetic characteristics of twelve Trypanosoma cruzi strains isolated from chronic chagasic patients, triatomines and sylvatic reservoirs from Paraná state, Southern Brazil, were studied using the randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) and simple sequence repeat-anchored polymerase chain reaction amplification (SSR-PCR) techniques. Sylvio and Esmeraldo stocks were used as reference for T. cruzi I and II, respectively. The DNA was amplified using three different primers for RAPD and (CA)8RY primer for SSRPCR. Gel analyses were scored by eye for a numerical taxonomy analysis based on the proportion of shared bands and by employing computer programs. The phenograms showed the existence of two distinct genetic groups: one containing the strains from chronic chagasic patients grouped with Esmeraldo and the other with the strains from triatomines and sylvatic reservoirs grouped with Sylvio. The existence of two phylogenetic groups of T. cruzi in Paraná state, Southern Brazil, is described for the first time.