Estudo para participação do receptor nuclear PPARy na resposta do hospedeiro frente à infecção por Mycobacterium bovis, BCG / Study for involvement of nuclear receptor PPARy in front of the host response to infection by Mycobacterium bovis, BCG

RESUMO

Os macrófagos são os principais agentes de defesa contra patógenos intracelulares e têm importante papel no metabolismo de lipídios e processos inflamatórios. Vários estudos demonstraram a participação de macrófagos “espumoso” durante a infecção intracelular por microbactérias, mas seu significado funcional é pouco entendido. Nosso laboratório tem mostrado que os corpúsculos lipídicos são organelas dinâmicas e funcionalmente ativas, que funcionam com sítios de sinalização em leocócitos para regulação do metabolismo lipídico e síntese de mediadores inflamatórios. Os mecanismos que regulam o acúmulo intracelular de lipídios, bem como a ativação de fatores transcricionais envolvidos no metabolismo lipídico de macrófagos, durante processos infecciosos, e seu signficado na patofisiologia e no curso de doenças desencadeadas por patógenos intracelulares não são completamente entendidos. Os Receptores Ativados por Proliferadores de Peroxissomos (PPARs) atuam em vários processos inflamatórios e imunoregulatórios devido à propriedade de regular a expressão de vários genes, estando desta maneira implicados na patofisiologia da aterosclerose, inflamação, diabetes e resposta imune. O papel do PPARy na resposta do hospedeiro frente à patógenos ainda não se encontra esclarecido. Assim nosso objetivo foi caracterizar o envolvimento do receptor nuclear PPARy na resposta do hospedeiro frente a infecções pelo patógeno intracelular Mycobacterium bovis, BCG. Em paralelo, investigamos o papel do receptor Toll-like 2 (TLR2) e outras moléculas sinalizadoras com CD14, CD11b/CD18, CD36, dectina-1 além de lipid rafts na resposta inflamatória durante a infecção por BCG. Nossos resultados demonstram que a infecção de macrófagos peritoneais de camundongos por M. bovis, BCG in vitro induziu aumento da expressão de PPARy, o qual foi acompanhado pela indução da formação de corpúsculos lipídicos, bem como aumento da produção de mediadores inflamatórios como PGE2 e citocinas. A expressão de PPARy e a produção de corpúsculos lipídicos e mediadores inflamatórios foram drasticamente inibidas em camundongos deficientes para o receptor TLR2, sugerindo um papel importante do TLR2 neste fenômeno. Demonstramos também que ativação de macrófagos in vitro pro agonistas de TLR2 (M. smegmatis, Pam3cys e zimosan) não foi capaz de induzir formação de corpúsculos lipídicos, sugerindo que ativação de TLR2, embora essencial para induzir expressão de PPARy ou formação de corpúsculos lipídicos na infecção, não é suficiente para desencadear vias de formação de corpúsculos lipídicos, indicando que outros co-fatores podem esta envolvidos. Nós verificamos de maneira significativa o envolvimento de CD14, CD11b, CD36, lipid raffs e dectina-1, na formação de corpúsculos lipídicos e produção de mediadores inflamatórios. Além disso, a neutralização do CD36 levou à inibição da expressão de PPARy induzida por BCG. Desta maneira sugerimos que a infecção por BCG altera significativamente os níveis de expressão de PPARy de maneira dependente de TLR2 e CD36 e que receptores nucleares ativados por lipídios podem modular a formação de corpúsculos lipídicos, síntese de PGE2, e a função de macrófagos durante infecções micobacterianas. O estudo da regulação e ativação de PPARy durante infecções por patógenos intracelulares poderá trazer contribuições sobre os mecanismos básicos de interação e escape na resposta patógeno-hospedeiro e poderá contribuir para a identificação de novos alvos terapêuticos para a tuberculose.