Estudo in vitro dos efeitos do bloqueador do canal decálcio (verapamil) sobre a biossíntese e contração damatriz extracelular / In vitro study of effects of calcium channel blocker (verapamil) on biosyntheses

RESUMO

Introdução: A adequada formação do tecido de granulação depende do equilíbrio entre abiossíntese e a degradação da matriz extracelular (MEC). A síntese excessiva de colágeno e adeficiente remodelação da MEC podem induzir o aparecimento de lesões dérmicas tipo quelóidese cicatrizes hipertróficas. Método: No presente estudo, utilizamos fibroblastos dérmicoshumanos povoados em gel de colágeno I, tratados ou não pelo bloqueador de canal de cálcio(verapamil). Uma vez no gel de colágeno, a morfologia tridimensional dos fibroblastos foianalisada por microscopia confocal e em cortes corados por hematoxilina & eosina. A atividadeda colagenase (MMP-I) foi determinada por “immunoblot” do meio condicionado. Resultados:Observamos neste estudo maior contração do gel de colágeno povoado por fibroblastoscontrole, quando comparado ao gel povoado por fibroblastos tratados com verapamil. A maiorcontração demonstrada pelos fibroblastos controle foi relacionada à reorientação das fibrascolágenas, à organização dos filamentos de actina e aos níveis de cálcio citosólico. Observamos,também, que o verapamil aumenta a secreção de colagenase. Conclusão: Concluímos que overapamil, ao alterar o metabolismo celular do cálcio, exerce influência sobre a contração daMEC e produção de proteases, com consequente efeito sobre o desenvolvimento de afecçõescicatriciais, como quelóides e cicatrizes hipertróficas.

ABSTRACT

Background: The appropriate formation of the granulation tissue depends on the balancebetween the biosyntheses and the degradation of the extracellular matrix (EM). The excessivesynthesis of collagen and the deficient degradation of the EM might cause dermal lesions suchas keloids and hypertrophic scars. Methods: In this study we used an experimental modelwhere collagen gels populated by dermal human fibroblast underwent progressive contraction.Fluorescence preparations were studied by confocal microscopy. Collagenase activity (MMPI)was determined in conditioned medium from fibroblasts using immunoblot. Results: Thisstudy showed a greater contraction of the gels populated with control fibroblasts per the timestudied in relation to the gels populated with fibroblasts treated with verapamil. Perhaps thishigher contracting ability is involved with actin organization and levels of cytosolic calcium.We also observed that verapamil increase the secretion of MMP-I. Conclusion: We concludethat cellular calcium metabolism appears to regulate EM production and contraction and thosehypertrophic disorders of wound healing (keloids and hypertrophic scars) may respond totherapy with calcium antagonist drugs (verapamil).