Detection of Porphyromonas gingivalis and Streptococcus intermedius in chronic periodontitis patients by multiplex PCR

RESUMEN

Se muestra la utilización del ensayo de polimerasa en cadena (PCR) múltiplex para la detección de Porphyromonas gingivalis y Streptococcus intermedius en pacientes con periodontitis crónica. Se analizaron un total de 180 muestrasde 65 adultos con periodontitis no tratada y 17 voluntarios sanos, las células se procesaron inicialmente colocándolas a baño María durante 10 min. El lisado celular fue usado comofuente de ADN para los ensayos del PCR múltiplex. Los primers fueron diseñados a partir de secuencias génicas defracciones 16 rRNA obtenidas de la base de datos GenBank-EMBL y que mostraron especificidad para los patógenos mencionados. El sistema PCR múltiplex fue diseñado para identificar 8.2 células de P. gingivalis y S. intermedius. De los pacientes con periodontitis, sólo el 78.5 por ciento fueron positivos para una o ambas bacterias. En el 37 por ciento se identificó únicamente P. gingivalis, en el 17 por ciento S. intermedius y en un 24.5 por ciento ambos. P. gingivalis fue detectada en el 23.5 por ciento de los voluntarios sanos, mientras que, S. intermedius no se detectó en esegrupo de pacientes. La distribución de la identificación de estas bacterias está relacionada con la profundidad de las bolsas periodontales. Mientras que el 95.23 por ciento de los pacientes con bolsas de 6 a 7 mm fueron positivas para ambas bacterias, mientras que sólo el 70.45 por ciento de ellos fue positivo cuando las bolsas tenían de 4 a 5 mm de profundidad