Comparación de diferentes protocolos para el cultivo de células madre mesenquimales de origen adiposo / Comparison of different protocols for the cultive of mesenchymal stem cells of adipose origin

RESUMEN

La literatura internacional reporta diferentes protocolos de aislamiento y cultivo para las células madre de origen adiposo, ADSC. Aunque una gran parte de los protocolos de aislamientos son efectivos, se ha podido determinar que en la mayoría de los casos en que se utilizan los protocolos de cultivo planteados se dan crecimientos celulares muy pobres. En esta investigación se montaron las células en botellas de cultivo de 25 cm2 en cuatro medios diferentes Medio Amniomax (GIBCO) (medio 1); Medio Ham´s F10 suplementado con 10 por ciento SFB, 1 por ciento antibiótico y ajustado para tener 2mm de L-Glutamina (medio 2); Medio Ham´s F10 suplementado con 10 por ciento SFB, 1 por ciento de antibióticos y ajustado para alcanzar 4mm de L-Glutamina (medio 3) y Medio Ham´s F10 suplementado con 20 por ciento de Suero Autólogo (SA), 1 por ciento de antibióticos y ajustado para alcanzar 4mm de L-Glutamina (medio 4). Después de realizado este experimento se logró determinar que con el medio 1 se obtenían crecimientos celulares marcadamente más rápidos que con los otros medios, consiguiéndose niveles confluentes en un lapso de 9 días (aproximadamente 6 millones de ADSC).

ABSTRACT

International literature reports different protocols for the isolation and cultive of adipose stem cells (ADSC). Although majority of the isolation protocols are effective, it has been determined that in most of the cases in which these cultive protocols are used, the cell growth rates are poor. Being the stem cells one promising therapeutic option, the group experimented with different cultive media to improve the times of cultive. In this investigation, the cell pellet was planted in a 25 cm2 cultive bottle in four different media Amniomax Media (GIBCO) (medium 1); Ham’s F10 Media supplemented with 10% SFB, 1% antibiotic and adjusted to 2mm de L-Glutamina (medio 2); Ham’s F10 Media supplemented with 10% SFB, 1% antibiotic and adjusted to 4mm de L-Glutamina (medium 3) and Ham’s F10 supplemented with 20% of autologous serum (SA), 1% antibiotic and adjusted to 4mm de L-Glutamina (medium 4). This experiment determines that medium 1 stimulates faster growth rates than the others, obtaining confluent levels in 9 days (approximately 6 million ADSC).